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IEF/SDS-PAGE技术及其在光温敏雄性不育水稻育性相关蛋白分析中的应用研究

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·湖南农业大学

本文对经典的IEF/SDS-PAGE技术进行了许多改进,实验结果如下:采用极端不平衡电极液配方可以明显扩展pH的分布范围,尤其是碱性部分pH分布,有效地抑制了阴极漂移现象;调整覆盖液和样品溶液的pH值,可以改善IEF胶中的pH分布;确立了一套密封的等电聚焦体系,可以减少电泳系统对CO_2吸收,从而抑制等电聚焦中的阴极漂移现象;建立了一个比较耐高电压的电泳系统,最高电压可达2500V,这对提高IEF的分辨率和重复性有非常重要的意义;本文还建立了一套挽救性的双银染程序,可以提高银染的分辨率;从本文的电泳图谱可以看出,用载体两性电解质进行蛋白质双向电泳,完全可以达到较好的分辨效果;利用改进的IEF/SDS-PAGE技术,对供试不育系水稻育性敏感期幼穗蛋白质进行双向电泳分析,发现:不育系幼穗中大部分的蛋白质在育性敏感期内的不同发育时期和不同温度条件下都稳定表达;不育系育性敏感期幼穗蛋白质的变化呈现一定的规律,其变化可以分为两类:一类是与  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>