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抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)单链抗体基因克隆及其在大肠杆菌和烟草中的表达

乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)表位是重要的乙肝病毒(HBV)表位,其识别肝细胞受体,并与HBV侵染人肝细胞有关。高亲和的抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)抗体具有封闭HBV的作用。噬菌体展示技术提供了获得结合特异表位抗体的新途径。我们用乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)体外免疫淋巴细胞,构建了抗PreS1(20-47)人源免疫抗体库。所获得的单链抗体的重链属人抗体V_H4亚族,轻链属人抗体V_λ4亚族,经检测,确定该单链抗体能与PreS1(20-47)特异结合,其亲合常数在10~(-7)-10~(-8)M范围内,具有潜在的应用价值。用大肠杆菌和烟草分别表达编码抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)表位单链抗体。融合硫氧还蛋白的单链抗体在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式得到高效表达,单链抗体表达量达占30%的总蛋白以上。经变性复性,用固相金属离子亲和色谱法一步分离纯化了具有功能的单链抗体,在一  (本文共119页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中西医结合肝病杂志》2002年05期
中西医结合肝病杂志

乙型肝炎病毒preS1基因真核表达载体的构建及表达

目的:构建含preSl基因真核表达质粒,探讨乙型肝炎病毒preSl基因在HBV入胞机制中的作用。方法:PCR法扩增含EcoR I与Pst I酶切点的preSl基因序列,PAS2-1载体及preSl基因PCR产物双酶切,经T_4DNA连接酶将两者连接并转化到大肠杆菌JM105,对重组质粒经序列测定,命名为PA...  (本文共3页) 阅读全文>>

《吉林大学学报(医学版)》2004年05期
吉林大学学报(医学版)

大容量天然人源单链抗体库的构建及抗乙型肝炎病毒PreS1单链抗体的淘选

目的 :从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒 Pre S1的单链抗体。方法 :以 6 0例健康供者的外周血淋巴细胞为来源 ,构建了 10 1 0人源天然单链抗体库 ,并以 Pre S1抗原肽进行淘选。 3轮淘选后 ,单克隆经 EL ISA检测 ,富集的特异性单克隆经 E.coli HB2 15 1表达后进...  (本文共3页) 阅读全文>>

《高技术通讯》2003年09期
高技术通讯

抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)的单链抗体在转基因烟草根分泌物中的初步表达

为探索利用植物根分泌表达重组蛋白的可行性,构建了含有抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20—47)单链抗体(S...  (本文共4页) 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

乙型肝炎病毒前S区不同片段的克隆、鉴定及与PreS1基因相互作用蛋白在酵母双杂交系统中的筛选

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Vires,HBV)属嗜肝脱氧核糖核酸病毒。其吸附,入侵肝细胞,是感染肝细胞并引起病变的第一步,病毒对细胞的感染常以病毒分子吸附于宿主细胞表面为先导,即病毒的囊膜蛋白(或无包膜病毒的衣壳蛋白)与细胞表面相应的病毒受体分子结合。这一过程常常成为决定病毒亲嗜范围与发病机理的主要因素。HBV表面抗原前S区具有丰富的生物学功能和较强的免疫原性,前S区与HBV对肝细胞的感染、病毒复制及病毒颗粒的装配密切相关,是HBV重要的保护性抗原。由此可见前S区在参与病毒与宿主细胞的相互作用中发挥着重要功能。目前对前S_1,前S_2抗原及其相关受体的研究成为HBV研究的一个热点。研究结果表明:前S_1(21—47aa)可直接与人肝癌HepG_2细胞特异性结合,前S_2则通过多聚白蛋白(pHSA)与肝细胞结合。对于HBV前S区病毒吸附蛋白及其相应受体的研究必将为我们深入了解HBV前S区的功能及其致病机制提供重要线索。...  (本文共74页) 本文目录 | 阅读全文>>

《健康之路》2015年11期
健康之路

PreS1抗原定量在恩替卡韦抗乙肝病毒治疗中的临床观察

目的:对PreS1抗原定量在恩替卡韦抗乙肝病毒治疗中的临床应用情况予以探究并分析。方法:随机选取我院自2013年10月2014年10月期间收治的乙肝病毒患者共100例作为本次研究对象,观察所有被研究对象采用PreS...  (本文共1页) 阅读全文>>