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2型糖尿病患者胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因5'-侧翼调控序列多态性与功能的研究

为了确定IRS-1基因5′-调控区可能存在的多态性,本文采用PCR-SSCP技术和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染分析,对76例2型糖尿病患者和78例正常对照IRS-1基因5′-UTR调控区-898bp~+5bp之间的序列,进行多态性扫描分析。以检获的正常和变异样品基因组DNA为摸板,以5′-TCTCCACCCGCCGAGATGGGCCCGGATG-3′和CGCGCTCTAGAAGTCCCAACGTTGCACGGGGTTCTCCCTC为上、下游引物(下划线者为XbaⅠ酶切位点),用高保真pfu DNA polymerase进行扩增。目的片段经PAGE纯化回收后,用XbaⅠ酶消化,然后采用亚克隆技术,在T4 DNA连接酶的作用下,将扩增片段分别定向插入至SmaⅠ/NheI双酶消化的pGL2-promoter报告基因载体,并转化至大肠杆菌DH5α。随机挑选单菌落小规模培养,碱裂解法提取质粒DNA,PstⅠ/BglⅡ双酶切后行变性聚丙烯酰  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

IRS-1对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

目的:随着人口老龄化的发展,骨质疏松症的发病率逐年提高,给患者个人、家庭、乃至社会都带来了严重的负担。骨质疏松症的发生与骨重建机制失衡有关,骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的定向分化在骨重建中扮演着重要的角色。转录共活化因子(Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)在维持骨髓间充质干细胞成脂-成骨分化平衡中具有重要作用。近年研究发现胰岛素受体底物-1(insulinreceptorsubstrate-1,IRS-1)可影响骨髓间充质干细胞的成脂分化,但其具体机制仍不清晰。本课题通过质粒转染技术、实时反转录定量PCR技术(reverse transcription quantitative PCR,RT-qPCR),沉默IRS1基因后测定BMSCs成脂分化过程中PPARγ与TAZ表达,探讨IRS...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

《上海中医药大学学报》2009年04期
上海中医药大学学报

复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠IRS-1基因表达的影响

目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗8周。氧化酶法测定血糖,放射免疫双抗体法测定血清胰岛素,RT-PCR法测定大...  (本文共4页) 阅读全文>>

《新中医》2020年17期
新中医

基于IRS-1信号通路探讨虎杖甙对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用

目的:探讨虎杖甙对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的改善作用及其作用机制。方法:SPF级SD大鼠100只,随机分为对照组,模型组,吡咯列酮组,虎杖甙低、高剂量组5组,每组20只。除对照组外,其余各组大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型。吡咯列酮组,虎杖甙低、高剂量组于模型制备成功后第1天开始灌胃相应药物,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。试验结束后,测定IR相关指标,RT-PCR法及Western blot法测定胰腺胰岛素受体底物-1(IRS-1)、葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)基因和蛋白水平。结果:与对照组比较,模型组空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)...  (本文共5页) 阅读全文>>

《河北医药》2019年14期
河北医药

骨组织中IRS-1水平与2型糖尿病性骨质疏松症的关系

目的探讨骨骼组织中IRS-1表达水平同2型糖尿病性骨质疏松症的关系。方法清洁级健康雌性Wistar大鼠为研究对象,适应性喂养1周后,随机分为正常对照组(NC组)、正常去卵巢组(NOVX组)、2型糖尿病对照组(DC组)和2型糖尿病去卵巢组(DOVX组),每组5只。以高脂饲料喂养8周后,腹腔注射链脲佐菌素,并实施双侧卵巢切除手术,建立2型糖尿病性骨质疏松症模型;卵...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国药师》2016年12期
中国药师

棕榈酸通过抑制IRS-1表达诱导大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗

目的:建立L6细胞胰岛素抵抗模型,筛选出最佳诱导条件,并探讨其作用机制。方法:用MTT法确定棕榈酸、胰岛素对L6细胞增殖的影响;用葡萄糖检测试剂盒检测葡萄糖含量,确定不同浓度的棕榈酸、胰岛素对L6细胞葡萄糖消耗的影响;通过Western Blot法检测IRS-1、PI3K、...  (本文共5页) 阅读全文>>