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IRES特异性抑制性RNA阻断丙型肝炎病毒基因表达的研究

HCV感染呈全球性分布,以不发达国家感染率为高,我国约为3%,该病原常可引起持续感染,且与肝硬化及肝癌发生率明显相关,是当前严重危害人类健康的重要传染病。由于其体外培养尚未成功,至今尚无满意的感染模型,因而极大的限制了HCV的研究及丙型肝炎的防治工作。迄今为止尚无有效的治疗策略。所以,寻找新的抗病毒策略,预防和清除HCV持续感染很有必要。基因治疗作为一种新型的治疗策略对HCV感染防治具有重要的意义,近年来得到国内外学者广泛认同的策略主要包括反义核酸策略、核酶策略、细胞内干扰性多肽或蛋白策略、抑制性RNA策略等。HCV为一单股正链RNA病毒,属于黄病毒属嗜肝病毒科。HCV基因含一长的5′UTR,内含多个起始密码子(AUGs),具特异的二级结构,该结构同脊髓灰质炎病毒(PV)和脑心肌炎病毒(EMCV)的核糖体内部进入位点(IRES)相似。IRES作为HCV基因表达和复制的关键结构成为基因治疗的靶位点之一。IRNA为Coward和Da  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

《北京理工大学学报(社会科学版)》2014年02期
北京理工大学学报(社会科学版)

能源统计的国际准则——IRES及其启示

通过对IRES制定背景、目的、原则、目标受众及内容进行梳理,探讨其编制思路和主要特点。研究表明:IRES按照"基础概念—核心内容—实施保障"思路进行编制,对能源相关概念范畴进行了明确,弥补了现有能源统计准则存在的不足;从能源供给、转换和使...  (本文共7页) 阅读全文>>

福建农林大学
福建农林大学

IRES介导Pot1 N端缺失片段的翻译

Shelterin是由端粒蛋白TRF1、TRF2、RAP1、TIN2、TPP1 和 Pot1 组成的复合物,对端粒保护和端粒维持起重要作用。Pot1是其中唯一具有端粒单链DNA结合能力的蛋白,其N-端由两个OB-fold结构构成。最近研究发现Pot1基因OB-fold编码区在慢性淋巴细胞白血病和家族性皮肤恶性黑素瘤中存在高频突变,使Pot1丧失端粒单链DNA结合能力,提示改变Pot1在染色体末端的端粒单链DNA结合在肿瘤发生发展中有重要意义。本实验揭示Pot1第一个OB结构域mRNA编码区存在一个未知的内部核糖体进入位点(IRES),能够使Pot1 mRNA同时表达出全长Pot1蛋白和一条缺失N端的一个OB-fold的Pot1片段。通过构建带有双标签的野生型Pot1质粒,我们发现全长Pot1 cDNA在多种细胞中同时表达出全长和一条N-端缺失的Pot1条带。在排除了抗体非特异、载体影响和标签影响后,通过构建Pot1 cDNA内部...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建医科大学
福建医科大学

携带IRES序列的腺相关病毒载体的构建及表达

目的:构建一种含内部核糖体进入位点( IRES)序列的腺相关病毒表达载体,用于简便、快速地了解睫状神经营养因子(CNTF)基因在转染细胞中的表达,为进一步探讨CNTF对大鼠视网膜及视神经的影响奠定基础。方法: 1.采用PCR技术,在质粒pIRES中扩增IRES序列,利用基因重组技术将IRES序列构建到腺相关病毒载体pAAV-CNTF-EGFP中。2.重组质粒pAAV-CNTF-IRES-EGFP和两种辅助质粒pHelper、pAAV-RC通过脂质体共转染AAV-293细胞,用荧光倒置显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。3.采用RT-PCR方法检测CNTF基因的表达。结果:1.重组的pAAV-CNTF-IRES-EGFP质粒经PCR筛选、酶切及测序鉴定证实构建成功。2.在荧光倒置显微镜下观察到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。3.采用RT-PCR方法在转染的AAV-293细胞中观察到CNTF cDNA的特异条...  (本文共39页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国生物化学与分子生物学报》2017年03期
中国生物化学与分子生物学报

内部核糖体进入位点(IRES)调控多种癌细胞系中尾型同源盒转录因子2的翻译

尾型同源盒转录因子2(caudal type homeobox transcription factor 2,CDX2)促进肠癌细胞增殖,并具有致瘤的潜能。然而,对于CDX2翻译水平的调控机制研究甚少。本研究基于转染及报告酶活性分析结果,首次证明CDX2 5'非翻译区(5'untranslated region,5'-UTR)存在内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES),并通过IRES在HEK293细胞以及肝癌、肠癌和卵巢癌等肿瘤细胞株中介导翻译起始。IRES介导的翻译机制与经典的帽依赖翻译途径(cap-dependent translati...  (本文共9页) 阅读全文>>

《黑龙江大学自然科学学报》1992年02期
黑龙江大学自然科学学报

信息检索专家系统IRES

本文介绍了信息检索专家系统IRES的设计与实现.知识库和推理机制都采用了模糊集合理论的方法.检索领域中的概念及共相互...  (本文共6页) 阅读全文>>