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CHO表达系统的遗传改造

哺乳动物细胞表达系统具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化蛋白药物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近天然蛋白分子,是目前重组糖蛋白药物生产的首选体系。对于较复杂的分子如基因工程抗体,以及基因治疗用病毒载体,哺乳动物细胞更是首选的表达宿主。但哺乳动物细胞表达系统的缺点也很明显,如表达量低、大规模培养困难、生产成本高昂等。一株成功的工程细胞除了要求目的蛋白的表达量高外,还必须适应无血清培养基培养;必须具有对不利环境的抵抗能力,即抗凋亡能力;对于非直接悬浮培养的细胞,还必须具备在无血清培养条件下的贴壁能力。工程细胞上述能力的获得仅由培养基配方和培养条件优化设计很难实现,必须从工程细胞本身着手,对细胞本身的生理特征进行改造,才有可能实现。鉴于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是目前基因工程制药最常用的哺乳动物宿主细胞,本研究集中对CHO细胞的部分基因进行了过表达或抑制,以期获得上述能力。实验分成四部分:1.高效哺乳动物细胞表达载体的构建  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

《食品与生物技术学报》2017年05期
食品与生物技术学报

人血清白蛋白-白介素-2融合蛋白在CHO细胞中的表达

白细胞介素-2在人体免疫应答中具有重要作用,常用于治疗肿瘤、肝炎和免疫缺陷性疾病等多种疾病,但因其体内半衰期短而限制了其临床应用。文中构建了含有融合蛋白基因HSA-IL-2的p MH3质粒,并通过电转染的方法转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO细胞)中,利用p MH3...  (本文共5页) 阅读全文>>

《化工管理》2017年27期
化工管理

Plackett-Burman和响应面法优化CHO细胞无血清培养基中关键营养成分

为了提高CHO细胞在无血清培养基中的生长和蛋白表达能力。通过文献选择16种物质,利用Plackett-Burman实验法筛选有出显著影响的4...  (本文共2页) 阅读全文>>

《湖北医药学院学报》2017年04期
湖北医药学院学报

接种重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)出现疑似异常反应1例报道

重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),英文名称(Recombinant Hepatitis B.Vaccine),是通过重组CHO...  (本文共2页) 阅读全文>>

《环境卫生学杂志》2015年05期
环境卫生学杂志

纳米氧化铜作用于CHO细胞的细胞毒性实时动态研究

目的对纳米氧化铜作用于CHO细胞在连续时间点所产生的细胞毒性效应进行研究,得到准确数据,为进一步毒性机制研究提供参考依据。方法应用RTCA(real-time cell analysis)对不同密度的CHO细胞进行长时间连续测定,绘制不同密度CHO细胞的完整生长曲线。对不同剂量的纳米氧化铜作用于CHO细胞所产生的毒性效应进行实时监测,得到不同作用时间的准确IC50值,绘...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国生物制品学杂志》2007年11期
中国生物制品学杂志

不含硫柳汞重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的免疫原性及稳定性

目的观察不含硫柳汞重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的免疫原性及其稳定性。方法配制12批不含硫柳汞的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),观察其免疫原性及在4、22和37℃保存不同时间的稳定性。...  (本文共3页) 阅读全文>>