分享到:

应用Drug-western法从cDNA表达文库中筛选青蒿素类抗疟药靶标蛋白基因

以总RNA中的mRNA构建的cDNA表达文库理论上含有该生物体的所有表达基因,可表达与天然蛋白相似的重组蛋白。建立cDNA表达文库在一次永久保存基因资源的同时,可以利用功能筛选、免疫学筛选、药物探针筛选、Southern杂交和大规模序列测定等现代分子生物学技术寻找特异性活性蛋白基因,进而克隆和表达这些基因,对从核酸及蛋白质等分子水平研究疟原虫的生命活动规律,对揭示其抗药性分子机理,搞清某些特效药物结合蛋白的基因及此类药物的作用机制,对新型抗疟药物的合理设计及筛选都具有极其重要的现实意义。青蒿素是从传统中草药菊科植物黄花蒿中分离出的一种具有内过氧桥结构的倍半帖内酯。青蒿素类药物是一种与已知抗疟药如氯喹等完全不同的新型化合物。大量药理及临床研究证明青蒿素类药物是优于氯喹的抗疟新药,具有速效、低毒、高效等特点。1991年Meshnick等人提出了青蒿素类药物作用的二步机制假说:首先疟原虫体内血红蛋白的降解产物-亚铁血红素与青蒿素结合,  (本文共91页) 本文目录 | 阅读全文>>

《分子植物育种》2003年Z1期
分子植物育种

基因表达文库的构建及其方法分析

基因表达文库构建和筛选技术是 80年代初发展起来的用于筛选和克隆基因的基本手段。表达文库中含有大量基因表达信息 ,使其成为广大实验室优先建立的文库之一。迄今为止 ,表达文...  (本文共5页) 阅读全文>>

《广西医科大学学报》2008年04期
广西医科大学学报

卵巢上皮性癌相关抗原cDNA表达文库的构建

目的:构建人卵巢上皮性癌cDNA表达文库。方法:提取卵巢上皮性癌患者腹腔积液肿瘤细胞mRNA,反转录合成双链cDNA,末端补平后连接EcoRI接头,末端磷酸化,XhoI消化,将双末端黏性化的双链cDNA经过凝胶层析柱,收集大于500bp的cDNA片段,...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国病原生物学杂志》2006年05期
中国病原生物学杂志

伊氏锥虫cDNA表达文库的构建

目的构建伊氏锥虫cDNA表达文库。方法利用DEAE-纤维素柱从小鼠血液中纯化伊氏锥虫,Trizol法提取总RNA,采用poly(A)Quik mRNA Isolation kit分离纯化mRNA。运...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国农业科学》2008年07期
中国农业科学

长角血蜱卵cDNA表达文库的构建

【目的】以长角血蜱卵为材料构建高质量的长角血蜱卵cDNA表达文库,为进一步筛选克隆目的基因奠定基础。【方法】在无RNA酶污染的环境下从长角血蜱卵中提取RNA,进而纯化mRNA,采取oligo(dT)引物合成双链cDNA,定向克隆到λSCREEN载体。用PhageMaker extract...  (本文共5页) 阅读全文>>

《地方病通报》2008年04期
地方病通报

新疆哈萨克族食管癌cDNA表达文库的建立

目的为筛选食管癌相关的差异表达基因和基因组,建立哈萨克族食管癌表达文库。方法应用DAzLE系统构建哈萨克族食管癌cDNA表达文库,包括Trizol一步法提取总RNA,Oligo(dT)纤维素层析柱纯化mRNA,Super Script TMChoice...  (本文共4页) 阅读全文>>