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人β-神经生长因子基因转染体外培养猫角膜内皮细胞促进其分裂再生的实验研究

目的:通过Effectene~(TM)脂质体介导将自行构建的人β-神经生长因子真核表达载体(pcDNA4-β-NGF)转染到体外培养的猫角膜内皮细胞中,证明人β-NGF基因不仅能在体外培养的猫角膜内皮细胞中得以表达并具有促进该细胞分裂再生的作用,为人角膜内皮病的基因治疗提供依据。方法:一、人β-NGF基因由单一外显子编码,利用PCR方法从正常人血基因组DNA中克隆出该基因,并连接于pcDNA4B真核表达载体上,构建重组真核表达载体pcDNA4-β-NGF,转入JM109大肠杆菌感受态细胞,筛选、酶切鉴定及计算机自动序列分析证明该基因为目的基因。二、组织块培养法简捷、快速体外培养出纯净的猫角膜内皮细胞单层,通过细胞形态学观察、神经特异烯醇化酶(NSE)单克隆抗体免疫组织化学染色及透射电镜观察鉴定细胞的种类及纯度。三、通过Effectene~(TM)脂质体介导将自行构建的人β-神经生长因子真核表达载体(pcDNA4-β-NGF)转染  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2017年04期
中国寄生虫学与寄生虫病杂志

约氏疟原虫红内期体外培养的研究

约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)红内期的体外连续培养尚未取得理想的效果。本研究在Trager等体外培养恶性疟原虫方法的基础上,对培养条件进行改进:将约氏疟原虫放在悬液系统培养仪的小室内,使用磁性搅拌器搅拌成悬液;每天更换培养基并向培养基中添加新的网织红细胞;37℃、5% C...  (本文共3页) 阅读全文>>

《北京农学院学报》2009年02期
北京农学院学报

蜂胶对体外培养的血管内皮细胞增殖活力的影响

本试验旨在研究蜂胶对体外培养的血管内皮细胞增殖活力的影响。试验以体外培养的血管内皮细胞作为模型,用100μmol/L过氧化氢诱导血管内皮细胞损...  (本文共3页) 阅读全文>>

《眼科研究》2002年06期
眼科研究

凝血酶对体外培养的视网膜色素上皮细胞生长的影响

目的 探讨凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 方法 利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,观察不同浓度的凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 结...  (本文共2页) 阅读全文>>

《湖北医学院学报》1984年01期
湖北医学院学报

疟原虫体外培养的国外研究进展

研究历史回顾 1880年Laveran发现人类疟原虫后不久,便开始了对疟原虫体外培养的研究。早期有...  (本文共5页) 阅读全文>>

华南农业大学
华南农业大学

猪睾丸细胞体外培养关键控制点的研究

细胞体外培养是使细胞在人工模拟的生理环境中生长繁殖的一种体外培养方式,是进行生物工程研究的一项重要技术。培养的细胞可以用来分离纯化病毒、生产疫苗和药物。离体细胞培养的成功为细胞结构与功能的研究创造了条件,包括各种细胞株的建立。这些培养的细胞已成为细胞生物学、免疫学等学科研究的重要途径。细胞体外培养需要满足一些基本条件:1.无菌无毒的培养环境;2.适宜的培养温度;3.合适的气体环境和pH;4.充足的营养,包括多种氨基酸、维生素、辅酶、核酸、嘌呤、嘧啶、生长因子。猪睾丸细胞(ST细胞)在猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等的繁殖和猪瘟疫苗的生产中广泛应用,是病毒繁殖、疫苗生产的重要细胞系之一。本研究对ST细胞的规模化培养工艺进行了研究,通过比较不同血清浓度(5%、10%、15%)、不同培养温度(35℃、36℃、37℃)和不同pH值(7.2、7.3、7.4)对ST细胞体外规...  (本文共42页) 本文目录 | 阅读全文>>