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水稻白叶枯病菌无毒新基因的功能鉴定以及Quorum Sensing相关基因的克隆和表达

1.用 IS-PCR 和 rep-PCR 法分析了 17 份分离自云南滇西高原粳稻区的水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae )和 7 个其它地区的水稻白叶枯病菌的群体遗传多样性。 2 个适合中国水稻白叶枯病菌的引物 J3 和 ERIC 对这 24 个菌系基因组 DNA 进行 PCR 扩增反应, J3 引物有 14 条条带,ERIC 引物有 13 条条带,2 个引物呈现 18 种谱型。用 PHYLIP Version 3.6 软件 UPGMA 聚类分析法分析白叶枯病菌系之间的遗传距离, 可将 24 个病原菌分为 4 簇,3 个来自菲律宾的白叶枯病菌与中国的菌系距离较远,云南高原粳稻区分离的菌系十分复杂,4个簇中都有,但主要集中在两个簇中,共有 14 个菌系。2.菲律宾白叶枯病菌株 PXO339 是 9a 生理小种的代表菌株,它对Xa7,Xa4,Xa10 和 Xa14 等抗病基因表现毒性,而对隐  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
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铜绿假单胞菌临床分离株致病特征及Quorum Sensing系统调控机制研究

[目的]从临床角度出发,排除人为因素影响,研究临床野生铜绿假单胞菌致病能力,探讨密度感应系统(Quorum Sensing, QS)与铜绿假单胞菌致病性的关系,为QS系统群体控制理论提供新信息,为临床控制铜绿假单胞菌感染提供第一手资料,为临床控制铜绿假单胞菌感染寻找新的治疗策略。[方法]以铜绿假单胞菌临床感染特征及对策为研究方向,以铜绿假单胞菌临床分离株为研究对象,分析铜绿假单胞菌临床感染分布特点、耐药规律;检测QS系统功能缺陷时铜绿假单胞菌毒力因子表达变化情况;检测QS系统编码基因突变特点,分析QS系统对毒力因子表达调控机制。[结果]1、本研究的铜绿假单胞菌感染在呼吸道最为突出;在ICU最为多见;铜绿假单胞菌耐药问题严重,有多重耐药,与目前大多数研究结果基本一致。2、本研究检测84株铜绿假单胞菌临床分离株,95.34%的菌株QS系统功能正常,QS系统功能缺陷株检出率只有4.76%。3、QS系统功能缺陷株多种毒力因子表达均有不同...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物技术》2006年06期
生物技术

假单胞菌Quorum sensing调控体系

群体感应(Quorum sensing,QS)是近来受到广泛关注的一种细菌群体行为调控机制,通过感应一些信号分子如酰基高丝氨酸环内酯(acyl-homoserine lactone,AHL)来判断菌群密度和周围...  (本文共4页) 阅读全文>>

河南农业大学
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干扰quorum sensing的细菌的分离及其干扰机制的初步探索

Quorum sensing是细菌中的一种环境信号感受系统。干扰病原细菌quorum-sensing系统的正常功能,可成为防治细菌病害的新策略。本研究的目的是从我国的土壤细菌中筛选能够干扰植物病原细菌quorum-sensing系统的资源,并初步解析其干扰机制。自北京、云南两地30余种植物根围土壤中随机分离细菌,以根癌农杆菌的quorum-sensing系统为模型,用“琼脂条”法和“报告菌平板”法,从近5,000个分离菌株中筛选得到15个能够干扰N-3-氧代己酰高丝氨酸内酯(N-3-oxohexanoyl-homoserine lactone,30C6-HSL,10~(-2) pmol)介导的quorum sensing的细菌菌株。这15个菌株对quorum sensing系统干扰能力和干扰特点不同。以菌株C11作为重点初步研究其抑制quorum-sensing系统的机制。该菌株干扰能力强,表现速度快,它所干扰的quorum-s...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
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穿心莲内酯对铜绿假单胞菌Quorum Sensing系统调控毒力因子产生及MexAB-OprM外排泵mRNA表达水平研究

目的鉴于铜绿假单胞菌的密度阈值感应系统(quorum sensing system,QS系统)在细菌致病性和耐药性中发挥重要作用,拟观察穿心莲内酯对铜绿假单胞菌QS系统调控的毒力因子表达的影响,以初步探讨穿心莲内酯抗感染机制。方法选取铜绿假单胞菌野生株和QS信号双突变株PAO-JP2,穿心莲内酯主要成分为亚硫酸氢钠穿心莲内酯。两种菌株各分两组:穿心莲内酯组和对照组。穿心莲内酯组穿心莲内酯浓度为12.5mg/mL,对照组为空白。对PAO1菌株测定穿心莲内酯组和对照组生长曲线变化,两种菌株分别测定穿心莲内酯组和对照组以下内容:(1)绿脓菌素(pyocyanin);(2)胞外蛋白水解酶(proteolytic activity);(3)弹性蛋白酶活性(elastase activity)。结果穿心莲内酯对铜绿假单胞菌未表现出生长抑制作用。(1)穿心莲内酯组绿脓菌素分泌较对照组受到明显抑制(P0.05)。结论穿心莲内酯可在mRNA水平抑...  (本文共46页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中科技大学
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铜绿假单胞菌Quorum Sensing信号分子N-(3-oxododecanoyl)homoserine lactone对肥大细胞作用研究

目的:通过化学方法合成铜绿假单胞菌Quorum Sensing(QS)信号分子3OC_(12)-HSL,并鉴定其结构、纯度及其生物活性。观察不同浓度3OC_(12)-HSL分子对肥大细胞细胞活力、细胞凋亡及胞内钙离子作用,同时观察肥大细胞释放IL-4,IL-6,组胺的释放及脱颗粒现象。方法:采用以(L)-甲硫氨酸为基础的合成路线,经与碘甲烷成甲基硫鎓盐、水解、环合得到(S)-高丝氨酸内酯盐酸盐;(S)-高丝氨酸内酯环与相应的酰氯反应或与酰化丙二酸亚异丙酯的缩合反应制得目的物。合成产物经质谱、磁共振确定其结构,经高效液相色谱确定其纯度,并采用带lacZ为报告质粒的3OC_(12)-HSL分子感应菌株E.coli MG4(pKDT17)检测其生物活性。通过化学合成具生物活性的3OC_(12)-HSL分子,以不同浓度(6.25-100μM)3OC_(12)-HSL分子作用于小鼠肥大细胞系P815,用WST-1方法观察不同时间点细胞活力...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>