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大熊猫基因资源库构建及粪便高质量DNA提取方法的建立

1.本文以大熊猫的成纤维细胞和肝组织细胞为材料,以pBeloBAC11为载体,构建了大熊猫基因组的细菌人工染色体DNA文库。该文库包含了93700个克隆,分别保存于977块96孔细胞培养板中。经过对100个随机抽样的克隆分析表明,插入片段的平均大小为160kb,相当于大熊猫基因组的5倍,即5个库容量。酶切10个克隆证明,经过100代繁殖后,其插入片段仍稳定不变。2.采用RNeasy Mini Kit提取大熊猫肝脏和脑组织的总RNA,经oligotex试剂盒纯化得到mRNA。利用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,构建了肝脏和脑组织的全长cDNA文库。在构建完成的文库中,肝脏文库含有约5.0×10~6个重组子,而脑组织文库含有约3.5×10~6个重组子。在2个文库中,插入的cDNA长度为400bp—4kb,重组率高达90%以上。鉴定结果表明,大熊猫肝脏和脑  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

郑州大学
郑州大学

DNA聚合酶β在人肺腺癌多药耐药细胞系中的作用及其机理的研究

资料表明,肺癌是导致死亡的主要肿瘤类型之一,并且有上升趋势。肺癌常分为两种类型:小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。其中NSCLC是肺癌中常见的类型,大约占肺癌发生率的80%,而且诊断时往往已经处于晚期。随着化疗药物的发展,紫杉醇(Paclitaxel)已经证明在治疗晚期NSCLC中具有显著的抗肿瘤活性。但是获得性耐药的出现,极大地限制了NSCLC的有效治疗。紫杉醇是从紫杉树皮中提取到的一种新型抗微管药物,其广泛的抗瘤谱和确切的疗效已经得到人们普遍的认同,目前主要用于治疗卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、头颈部肿瘤等。紫杉醇耐药机制比较复杂,目前尚不清楚,可能与多种机制有关。DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,DNA polβ)广泛分布于哺乳类细胞中,是真核细胞主要的DNA损伤修复基因,其D...  (本文共126页) 本文目录 | 阅读全文>>

《教育观察》2019年30期
教育观察

基于科学思维的“DNA是主要的遗传物质”教学设计

"科学思维"是指尊重事实和证据、崇尚严谨和务实的求知态度,运用科学思维的方法认识事物、解决实际问题的思维习惯和能力。"DNA是主要的遗...  (本文共2页) 阅读全文>>

《生态学报》2019年22期
生态学报

基于粪便DNA的贺兰山岩羊亲权鉴定和婚配制研究

2017年7—8月和11—12月在贺兰山岩画风景区采集到369份岩羊新鲜粪便样本,用多态性较高的10个微卫星位点进行基因分型,共识别出282只岩羊个体。通过复合扩増和牙釉蛋白基因PCR法共鉴定出152只雄性,130只雌性。微卫星分析得到平均等位基...  (本文共9页) 阅读全文>>

《生物化工》2019年06期
生物化工

通过调节蛋白酶K消化时长优化DNA提取方法

近年来,随着生物技术的不断发展,提高了生物制品的质量,其中DNA提取是生物工程中的常规操作。本文首先...  (本文共4页) 阅读全文>>

《微生物学报》2019年12期
微生物学报

蛹虫草线粒体DNA与细胞核DNA进化关系的比较

【目的】分析蛹虫草是否存在核内线粒体DNA片段,比较蛹虫草线粒体DNA与细胞核DNA的碱基变异程度及所反映的菌株间的系统发育关系。【方法】通过本地BLAST或LAST对蛹虫草线粒体基因组和核基因组进行序列相似性搜索;从10个已知线粒体基因组的蛹虫草菌株中分别扩增7个细胞核蛋白编码基因片段,...  (本文共11页) 阅读全文>>