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银白杨再生体系建立及rolB-pttGA20ox双价基因遗传转化促进生根和高生长的研究

银白杨(Populus alba)是我国西北地区重要的速生造林树种,其材质优良,抗逆性强,但扦插繁殖不易生根,生长速度也比其他白杨慢,在很大程度上限制了这一优良树种的推广与应用。本研究的主要目标是通过农杆菌介导的遗传转化方法导入rolB-pttGA20ox双价基因,利用基因工程技术开展改良生根性状的转基因研究,从而培育扦插生根能力强、生长快的银白杨新品种。围绕这一目标,本研究以银白杨当年生枝条的带芽茎段为外植体,首先建立了该树种的离体快繁及植株再生体系,并就培养条件和植物生长调节剂等因素对银白杨叶片直接再生体系的影响进行了详细的研究;然后利用NPTⅡ筛选基因对影响根癌农杆菌介导银白杨遗传转化的条件做了深入探索,通过优化转化条件,建立了银白杨遗传转化体系;最后在此基础上,进行rolB-pttGA20ox双价基因的转化,并由PCR、Southern杂交和形态特征差异检测,以证明是否为转化植株。主要研究结果如下:1.茎段再生不定芽体系  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京林业大学
北京林业大学

胡杨再生体系的建立及rolB-pttGA20ox基因的遗传转化研究

本研究以胡杨当年生枝条的带芽茎段为外植体,首先建立了它的离体快繁及植株再生体系,并就植物生长调节剂等因素对胡杨叶片再生不定芽的影响进行了详细的研究;然后利用NPTⅡ筛选基因对影响根癌农杆菌介导胡杨遗传转化的条件进行了深入探索,通过优化转化条件,建立了胡杨遗传转化系统;最后在此基础上,进行rolB-pttGA20ox双价基因的转化,并由PCR、PCR-Southern杂交分子检测,验证rolB-pttGA20ox基因的插入情况。研究结果摘要如下:1.胡杨组培再生体系的建立消毒的最佳方法为:夏季采集的材料: 70%的酒精浸泡30sec后,以0.1%氯化汞分别灭菌7min、8min;初春水培枝条:试剂同上,茎尖灭菌0.5min,茎段灭菌1.0min。最适宜的启动培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+糖20 g/L为增殖培养的最佳配方,生根培养的最适培养基为1/2...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>

《北方园艺》2010年13期
北方园艺

转rolB-pttGA20ox双价基因毛白杨光合特性研究

为探讨转双价基因毛白杨光合特性与规律,以4个转rolB-pttGA20ox双价基因毛白杨株系和1个对照株系PT-16的1 a生盆栽苗为材料,采用Li-6400光合测定系统对其光合作用指标进行测定,并分析光合特性与苗木生长的相...  (本文共4页) 阅读全文>>

《河北农业大学学报》2009年04期
河北农业大学学报

rolB-pttGA20ox双价基因在毛白杨中的表达及转化植株的形态特征

本研究对已整合外源rolB-pttGA20ox双价基因的毛白杨株系进行半定量RT-PCR检测,并对移栽后的转基因植株进行形态观测。结果表明:rolB和pttGA20ox基因的表达模式不同,rolB基因在不同器官中的表达强度为根茎叶,pttG...  (本文共5页) 阅读全文>>

北京林业大学
北京林业大学

rolB-pttGA20ox双价基因转化毛白杨及遗传稳定性研究

毛白杨(Populus tomentosa Carr.)是我国特有的优良白杨派乡土树种,具有材质优良、寿命长、抗性和适应性强等特点,是我国北方地区常用的建筑、家具用材和造纸工业原料树种,对美化环境和保持水土也有重要作用。但毛白杨的插条生根较难、扦插成活率低,在很大程度上阻碍了这一优良树种的推广和产业化进程。本研究通过农杆菌介导的叶盘转化方法,将双价基因rolB-pttGA20ox转入毛白杨优良无性系PT-16和PT-19基因组中,开展利用基因工程育种技术改良生根和高生长性状的研究;并以转rolB-pttGA20ox双价基因烟草为试材,探讨了双价外源基因在转化植株中的表达稳定性和遗传特性。主要研究结果如下:1、优化了农杆菌介导的毛白杨遗传转化体系。首先确定毛白杨PT-16和PT-19叶片外植体不定芽诱导卡那霉素(Kan)临界耐受浓度为25 mg/L,试管苗不定根再生Kan临界敏感浓度为20 mg/L。高效的毛白杨叶盘转化方法为:叶...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>