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用cDNA消减杂交法克隆白血病细胞K562分化相关基因

细胞分化是人类和多细胞生物生长发育中的一种重要方式,它通常并不是异常的和有害的。细胞分化调节的异常与许多疾病有密切的关系,如白血病通常由于造血干细胞定向分化的过程中出现异常而发生,导致细胞不能终末分化并无限增殖。研究细胞分化的机制可以阐明生命的本质规律和肿瘤发生的机制,为实现生物学过程的人为控制创造条件。克隆细胞分化相关基因可以进一步深化我们对这一生命现象的认识,并可指导肿瘤的治疗。因而克隆细胞分化相关基因具有深远的意义。本研究利用cDNA消减杂交的方法,以Hexamethylene Bisacetamide(HMBA)诱导慢性髓系白血病细胞系K562细胞向巨噬细胞样分化这一以往研究得较少的模型,来研究细胞分化相关基因。通过cDNA消减杂交的方法,对K562细胞分化前后差异表达的基因进行了克隆,共得到64个克隆,其中53个有插入片段。利用Reverse Northern杂交的方法,证实其中39个克隆中有13个在分化前后表达有差异  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物化学与生物物理进展》1950年50期
生物化学与生物物理进展

基因组消减杂交技术及其应用

基因组消减杂交是通过突变型(驱赶DNA,driver)与野生型(检测DNA,tester)基因组DNA之间的差异比较来分离和鉴定突变基因的方法,该方法具有简便、...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物化学与生物物理进展》1960年40期
生物化学与生物物理进展

人细胞差异表达基因cDNA消减杂交体系的建立

为克隆肺腺癌分化相关基因,采用诱导分化与消减杂交相结合的策略,建立了全反式维甲酸(RA)诱导前后人肺腺癌细胞系的cDNA消减文库,得到124个cDNA消减克隆.经加减法杂交差异筛选...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中日友好医院学报》2007年04期
中日友好医院学报

唐氏综合征消减杂交文库的构建及差异表达基因筛选

目的:分离和鉴定唐氏综合征胎儿与正常胎儿脑组织差异表达的基因片断,为进一步认识DS脑病变发生的分子机制奠定基础。方法:利用抑制性消减杂交的方法对DS胎儿及正常胎儿脑组织样品进行正向消减杂交,利用斑点杂交对所获的基因片...  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物技术通讯》2002年05期
生物技术通讯

标化消减杂交:提高差异表达cDNA筛选效率的新策略

在回顾分析了消减杂交技术改进历程的基础上,我们提出了“标化消减杂交策略”。此策略的核心是“用标化cDNA制备消减杂交反应的单链驱动子和单链示踪子,分离回收消减杂交后的单链示踪子用于制备差异表达cDNA文库,并从标...  (本文共4页) 阅读全文>>

《解放军医学杂志》2005年12期
解放军医学杂志

应用锚定消减杂交技术克隆分析大鼠脊髓原代神经元损伤、修复相关基因

目的克隆大鼠脊髓原代神经元细胞损伤、修复相关基因,从分子水平探讨中枢神经系统损伤修复的机制。方法建立脊髓原代神经元体外损伤模型,运用改良的锚定消减杂交技术,克隆分析与原代脊髓神经元细胞损伤、修复相关...  (本文共4页) 阅读全文>>