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融合基因ag85B-mpt64_(190-198)-mtb8.4在抗结核新型重组卡介苗以及亚单位疫苗研究中的应用

结核病(Tuberculosis,TB)是一种古老而漫长的感染性疾病,是长期危害人类健康的严重疾病之一。近年来,由于HIV和结核分枝杆菌双重感染,以及耐药型结核分枝杆菌的流行,导致结核病的发病率和死亡率大幅度上升。目前全球大约有20亿人感染上结核病,感染人数接近全世界人口的三分之一,其中每年有85%的死于结核病的患者,以及95%的疑似新发结核病例,都发生在发展中国家。结核病严重威胁着人类健康,联合国已将结核病列为21世纪重点控制的三大疾病之一。目前研制成功的唯一的能够预防结核病的疫苗——卡介苗,虽然已在全球范围内广泛使用,但在近期研究中发现,其许多临床试验结果并不是十分有效,免疫预防效果不稳定,在全球范围的免疫保护力检测,由0-80%不等,并且对成人几乎无效,对已感染患者更是没有治疗作用,可以说卡介苗并不是预防肺结核的理想疫苗,研究和开发新的结核疫苗势在必行!现阶段研究结核病疫苗主要集中在以下几个领域:1.以BCG为载体,重组进  (本文共131页) 本文目录 | 阅读全文>>

重庆医科大学
重庆医科大学

结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗对鼠结核杆菌感染的保护作用

目的:本研究拟从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出ag85b、mpt64以及引入甘氨酸接头连接的Ag85B-MPT64融合基因(AM),构建DNA疫苗并探讨其在小鼠体内诱导的免疫应答和在小鼠结核感染模型中的保护作用,为新型结核病疫苗的研制奠定基础,同时也为结核病的免疫防治提供理论和实验依据。方法:1、用PCR和基因克隆技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85B、MPT64编码基因以及通过甘氨酸接头连接的Ag85B-MPT64融合基因(AM),构建真核表达质粒pcDNA/Ag85B、pcDNA/MPT64和pcDNA/AM,用酶切和双向DNA测序进行鉴定;2、将MPT64、Ag85B编码基因亚克隆入pET32a中,构建pET/Ag85B和pET/MPT64原核表达质粒,使其在大肠杆菌中表达并鉴定。用重组的MPT64和Ag85B蛋白免疫BABL/c小鼠, 制备MPT64与Ag85B抗血清。3、将pcDNA3.1(+)、p...  (本文共134页) 本文目录 | 阅读全文>>

《细胞与分子免疫学杂志》2003年06期
细胞与分子免疫学杂志

结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗的免疫效果观察

目的:研究并比较结核分枝杆菌(H37Rv)Ag85B、MPT64DNA.以及两者的融合基因(AM)的免疫原性。方法:雌性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组,即A组(PBS)、B组(peDNA3.1)、C组(pcDNA/Ag85B)、D组(pcDNA/MPT64)和E组(pcDNA/AM)。分别于胫前肌注射7.5 g/L利多卡因和质粒混合物(1:4,100μL,含质粒70μg/次...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国人兽共患病杂志》2004年03期
中国人兽共患病杂志

结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的 构建结核分枝杆菌早期分泌蛋白Ag85B和MPT6 4融合基因 (AM )及其原核表达质粒并进行表达。方法 采用 geneSOEing法将ag85b和mpt6 4用疏水甘氨酸接头 (Gly4Ser) 3 融合 ,经限制性内切酶切后克隆入原核表达载体pET32a中 ,进行酶切、PCR鉴定和...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中华医学杂志》2004年08期
中华医学杂志

Ag85B-MPT64融合基因疫苗对鼠结核分枝杆菌感染的保护作用

目的 研究Ag85B MPT6 4 (AM)融合基因疫苗对鼠结核分枝杆菌感染的保护效果。方法 C5 7BL/ 6小鼠 6 3只 ,随机分为磷酸盐缓冲液 (PBS)、空质粒、卡介苗 (BCG)、pcDNA/Ag85B、pcDNA/MPT6 4、pcDNA/Ag85B +pcDNA/MPT6 4、pcDNA/AM组 ,采用肌肉注射法免疫小...  (本文共5页) 阅读全文>>

《第四军医大学学报》2003年12期
第四军医大学学报

结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因的构建表达

目的 :构建结核分枝杆菌 (H37Rv)Ag85B MPT6 4融合基因并在真核细胞中表达 .方法 :采用序贯PCR(geneSOEing)法将Ag85B和MPT6 4编码基因用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser) 3经PCR扩增融合 ,定向克隆入 pcDNA3.1(+)中 .采用脂质体转染法将...  (本文共3页) 阅读全文>>