诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体的构建
目的 构建含有人诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3 iNOS。方法 采用分子生物学技术 ,以HindⅢ和XbIⅠ双酶切pSPORT iNOS,电泳回收 3.96kb编码人iNOScDNA序列 ,克隆入真核表达载体pcDNA3 的HindⅢ和XbIⅠ位点。
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- 肝胆外科杂志
目的 构建诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体 pc DNA3/ i NOS,并以脂质体为介导观察其在肝窦内皮细胞中的转染效率及表达情况。方法 先用限制性核酸内切酶 Hinc +Cla 酶切质粒 PSP/ i NOS和 PU C6 s,构建 PU C6 s/ i NOS中间质粒 ,再用 Hind +Xhol酶切质粒 PUC6 s/ i NOS和 pc DNA3,构建 pc D...
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- 医学研究生学报
目的 :构建大鼠谷氨酰胺酶 (GA)反义真核表达载体。 方法 :采用分子克隆技术将rGAcDNA反向克隆到真核表达载体pcDNA 3.0中...
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- 医学研究生学报
目的构建含有标签蛋白的人环指蛋白11(ring finger protein 11,RNF11)的真核表达载体,并观测其在293T细胞中的表达。方法使用MEGA5.0等生物学软件构建人RNF11的分子进化树;应用RT-PCR从4种人胃癌细胞系中检测到该基因的表达,并将其克隆到pEASY-Blunt载...
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- 临床肝胆病杂志
目的克隆HBeAg基因,构建重组HBeAg真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中进行表达。方法采用PCR法从HBeAg阳性乙型肝炎患者血清HBV DNA中扩增HBeAg基因,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建重组pcDNA-HBeAg真核表达载体,经PCR、双酶切、测序鉴定后,将其转染入CHO细胞,G418筛选,用PCR、免疫斑点、Western Blot、免疫细胞化学方法检测HBeAg在CHO细胞中的表达。结果成功克隆到HBeAg基因,并构建了重组pcDNA...
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- 中国医学工程
目的构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因(sTNFR1)的真核表达载体,为进一步研究打下基础。方法以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增人sTNFR1全编码区基因片段,构建...
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- 中国预防兽医学报
拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ， ＧＦＰ）基因的真核表达载体 ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ，并观察其在 ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_3，以ＢａｍＨ...
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