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人肝再生增强因子基因的克隆和真核表达载体的构建

从6月龄流产的胎儿肝脏中提取总RNA,利用反转录-PCR(RT-PCR)技术扩增出人肝细胞再生增强因子hALR(Human augmenter of liver regeneration)基因片段,克隆于PET28a(+)  (本文共4页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

人肝再生增强因子基因的克隆、真核表达载体构建及原核表达

人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)是一种新的细胞因子,能特异性地刺激肝源细胞的增殖,并对四氯化碳、半乳糖胺等肝毒剂引起的肝损伤有治疗作用。本课题选用hALR作为研究对象,重点研究其分子克隆、真核表达载体构建及原核表达。本实验从6月龄人胎肝中提取总RNA,利用两步法RT-PCR技术扩增hALR基因片段。将hALR基因克隆到原核融合表达载体PET28a(+)上,序列分析后亚克隆到真核表达载体pcDAN3.1(+)上。将原核表达载体的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导物进行诱导表达,探索最佳诱导时间和诱导物的使用浓度。利用Western-blot和Scion Image 4.02 Beta生物学图像分析软件对表达蛋白进行定性和定量分析。本实验成功地克隆出431bp的hALR基因片段,经序列分析表明,与Genebank中发表的hALR序列相比有3个...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>

《微生物学通报》1984年06期
微生物学通报

DNA序列分析技术的进展

近几年来,DNA序列分析技术有了很大发展,可以说,分子生物学突飞猛进的发展与DNA序列分析技术的不断改善是分不开的。虽然Wa...  (本文共4页) 阅读全文>>

河南农业大学
河南农业大学

猪盖他病毒检测方法的建立与应用及病毒的分离鉴定和序列分析

猪盖他病毒(Getah virus,GETV)是一种虫媒病毒,可引起马出现发热、皮疹、后腿水肿和淋巴结肿大;出生仔猪震颤、皮肤发红、精神颓废、棕黄色腹泻及较高的死亡率;母猪(尤其妊娠前期)产死胎;人体内只检测到特异性GETV抗体。GETV于1955年首次出现在马来西亚雪背库蚊中,1956年从三带喙库蚊分离到同种的鹫山病毒(Sagiyama virus,SAGV)。中国于1964年从海南省库蚊中分离出GETV分离物,并命名为M1。对蚊子、库蠓、马、猪、鸟类、狐狸和人等媒介或宿主的流行病学调查,发现盖他病毒现已广泛分布于亚洲、北欧和澳大利亚北部的太平洋沿岸。作者于2016年从中国发病猪中首次分离GETV,然而关于其对猪致病性和在中国猪群流行情况等尚不清楚。本研究通过对GETV检测方法的建立,流行毒株的分离鉴定,NSP3、Cap基因及全基因组序列测定与分析,了解其在中国猪群中的流行动态、变异特点和遗传进化方向,以期为研究GETV演变过...  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

《现代仪器》2001年06期
现代仪器

毛细管电泳与DNA序列分析

本文报导了毛细管电泳基本理...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生物工程学报》1970年10期
生物工程学报

P16~(ink4)cDNA的克隆及序列分析

P16ink4cDNA的克隆及序列分析黄长晖邓炜傅继梁(第二军医大学生物教研室,医学分子遗传学开放实...  (本文共3页) 阅读全文>>

《微电子学与计算机》1991年02期
微电子学与计算机

一种用于图象序列分析的基于规则的证据收集方法

本文提出一种用于图象序列分析的基于规则的证据收集方...  (本文共5页) 阅读全文>>