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家蚕质型多角体病毒RDRP基因的序列测定及同源性分析

应用分段RTPCR方法和分子克隆技术从家蚕质型多角体病毒(Bombyxmoricytoplasmicpolyhedrosisvirus,BmCPV)中国株的dsRNA中成功地分3段克隆了RDRP基因(RNAdependentRNApolymerase),大小分别为1442、827、1675bp,进行了基因全序列拼接,  (本文共6页) 阅读全文>>

《植物病理学报》2017年03期
植物病理学报

建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物(CyMV-GZ)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列。测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基。构建原核表达载体pET3...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国卫生检验杂志》2012年06期
中国卫生检验杂志

诺如病毒RdRp区和核心区部分基因克隆及序列分析

目的:明确引起急性胃肠炎暴发的诺如病毒RdRp区和衣壳区部分核酸序列,确定病毒基因亚型。方法:采集腹泻病人粪便标本,提取病毒核酸,通过RT-PCR扩增长度为387 bp的病毒RNA...  (本文共3页) 阅读全文>>

《电子显微学报》2005年01期
电子显微学报

家蚕质多角体病毒RDRP的免疫电镜定位研究

以原核表达BmCPV RDRP重组蛋白为抗原制备的兔抗血清为一抗,直径15nm山羊抗兔IgG 胶体金为二抗。应用3%多聚甲醛 0 1%戊二醛混和固定液、K4M低温包埋剂和紫外光聚合制备的样品进行免疫电镜观察,结果...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2015年05期
中国预防兽医学报

抗Ⅰ型鸭肝炎病毒RdRp蛋白噬菌体单链抗体库构建及单链抗体的淘选

为构建抗1型鸭肝炎病毒(DHV-1)RdRp蛋白的单链抗体(scFv)库,并淘选特异性scFv,本研究采用RT-PCR方法从DHV-1基因组中扩增Rd Rp基因,将其克隆于pET-32a载体中进行重组RdRp蛋白原核表达。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,以提取的免疫鼠脾脏总RNA为模板,利用抗体轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)简并引物,经RT-P...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国农业大学
中国农业大学

尖孢镰刀菌小RNA发生相关Dicer,Argonaute和Rdrp基因功能研究

在真核生物中,小RNA具有修饰染色质,降解mRNA,抑制mRNA翻译,抑制转座子转位、抵御病毒侵袭等重要的调控作用。小RNA的发生与作用机制是在一系列小RNA发生蛋白的参与下完成的。本文以粘团专化型尖孢镰刀菌生理小种1号(FOX-A8)为代表,通过基因敲除三类主要的小RNA发生相关基因家族Dicer(Dcr1和Dcr2)、Argonaute(Agol和Ago2)及RNA dependent RNA polymerase (Rdrp1、Rdrp2和Rdrp3),比较基因敲除突变体(ΔDcr、ΔAgo、ΔRdrp)与野生型之间的生长表型及致病力的差异,探讨Dcr、Ago及Rdrp的基因功能,为揭示尖孢镰刀菌小RNA发生的分子遗传机制奠定理论基础。具体研究结果如下:1.Dcr2基因与菌丝生长发育明显相关,与野生型的菌丝相比较,ΔDcr2及ΔDcr1/2菌丝分支较多,但是对分生孢子的形态并无影响;ΔDcr1、ΔDcr2及ΔDcr1/2总...  (本文共114页) 本文目录 | 阅读全文>>