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抗preS1分子高效单克隆抗体的制备及其在血清LHBs检测中的应用

目的制备可用于血清LHBs检测的针对preS1高效单克隆抗体并进行初步临床应用研究。方法对乙肝preS1区段基因(B基因型,adr血清亚型)全长序列(1~119 aa)进行密码子偏嗜性改造后,克隆入质粒pET32a构建原核表达重组质粒并转化入大肠杆菌BL21(DE3),采用离子交换、HIS亲和层析柱以及肠激酶(EK酶)酶切等方法建立preS1重组蛋白的纯化工艺,制备筛选单克隆抗  (本文共4页) 阅读全文>>

《军医进修学院学报》2011年10期
军医进修学院学报

乙型肝炎病毒大蛋白(LHBs)检测的临床价值

目的探讨乙型肝炎病毒大蛋白(LHBs)诊断乙型肝炎的意义。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乙型肝炎病毒大蛋白(LHBs)、乙肝病毒前S1(PreS1),采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA。结果 HBeAg阳性样本中乙型肝炎病毒大蛋白与HBV DNA的检出无显著性差异(χ2=2.46,P...  (本文共2页) 阅读全文>>

《肝脏》2008年06期
肝脏

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者LHBs水平的变化

近年来随着对乙型肝炎表面抗原大蛋白(LHBs)中前S区抗原在乙型肝炎发病机制、感染与复制等方面研究的深入,逐渐认识到...  (本文共2页) 阅读全文>>

权威出处: 《肝脏》2008年06期
第三军医大学
第三军医大学

抗preS1高特异性单克隆抗体的制备及其在血清LHBs检测中的应用

乙型肝炎病毒的致病性来源于包封有病毒DNA的直径约42nm的球形病毒颗粒。乙肝病毒基因组有四个开放阅读框,由于翻译起点不同,前S区/S区基因编码病毒表面三种抗原分子,分别是前S1蛋白(preS1),前S2蛋白(preS2)和S蛋白。乙肝表面抗原由三种被膜糖蛋白组成,分别是乙肝病毒大蛋白(LHBs),中蛋白(MHBs)和主蛋白(SHBs)。从最上游启动密码子开始翻译产生的乙肝病毒大蛋白(LHBs)被认为在病毒与宿主细胞受体的结合以及病毒颗粒的聚集和从细胞中释放等过程中发挥重要作用。与其它表面膜蛋白不同的是,LHBs在其N末端拥有preS1区域。因此,研究该区域的生物学特性和免疫原性非常重要。preS1分子位于LHBs的表面,受宿主免疫应答调节,具有很强的免疫原性,所以preS1区域也反映了HBV的基本生物学特性。研究发现,在乙肝表面抗原阴性患者的血清及肝脏中出现preS1蛋白已经被认为是HBV感染的标志物,代表着病毒的复制。因为L...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

乙型肝炎病毒大S蛋白(LHBs)和X蛋白(HBx)对肝癌发生和转移的调控及其功能的研究

在HBV相关肝癌中,乙型肝炎大S蛋白(hepatitis B virus Large S protein, LHBs)和乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein, HBx)是肝癌组织中最常被检测到HBV相关蛋白。尽管已有部分研究证实LHBs和HBx可通过影响细胞本身信号通路来激活基因转录促进肝癌发生,然而对于LHBs和HBx在HBV相关肝癌(HBV-associated hepatocellular carcinoma, HBV-HCC)发生发展过程中的作用仍有许多不明之处。已有研究发现HBV转基因小鼠过表达LHBs,毒性剂量的SHBs在肝细胞内积累,持续的肝细胞损伤诱导肝脏条件性反应,如:炎症、再生、异常转录、非整倍体和最终进展为肝肿瘤。此外在几乎所有HBV转基因小鼠肝细胞被发现有HBsAg阳性的毛玻璃样改变,但在肝细胞恶性转化过程中(包括改变肝细胞结节,肝细胞腺瘤和肝细胞癌)广泛表达的HBs...  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建医科大学
福建医科大学

酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白(LHBs)相互作用的去泛素化酶

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是全世界急慢性肝炎、肝硬化、及肝细胞癌的主要原因。HBV含有C、S、P、X 4个开放阅读框,其中S区编码的三种蛋白质即小蛋白(SHBs),中蛋白(MHBs),大蛋白(LHBs),形成病毒包膜。其中LHBs与HBV相关性肝癌发生发展密切相关,但目前对LHBs蛋白水平的调控机制尚无报道。特定蛋白质的数量,除了受转录水平以及蛋白质合成的影响外,泛素化与去泛素化的动态平衡是一种非常重要的翻译后修饰调控机制。本研究旨在探讨影响LHBs蛋白水平的去泛素化酶及其机制。本研究采用细胞核酵母双杂交系统Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System,构建pGBKT7-LHBs重组质粒,验证其可表达GAL4 BD-LHBs融合蛋白,以及无自激活现象。利用实验室保存的74种去泛素化酶酵母表达转化子库,采用一对一双杂交的方法筛选与LHBs相互作用的去泛素化酶,得...  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>