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KDR siRNA表达载体的构建和鉴定

目的构建针对血管内皮生长因子受体Ⅱ(VEGFR2),又称激酶功能区受体(KDR)的pSilencerTM3.1siRNA(smallinterferingRNA)表达载体,并在前列腺癌细胞PC3中观察其干扰效果.方法设计针对KDR基因编码区的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经BamHⅠ,HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSilencerTM3.1-H1neo中,对重组质粒进行酶切分析和DNA系列测定.以脂质体法将pSilencerTM3.1-H1neo空载体和3个(pSilencer  (本文共4页) 阅读全文>>

《同济大学学报(医学版)》2006年01期
同济大学学报(医学版)

RNAi抑制骨肉瘤细胞KDR蛋白表达的研究

目的研究siRNA表达载体对骨肉瘤MG63细胞KDR蛋白表达的抑制作用。方法构建pSuper质粒,化学合成2段编码发卡RNA序列、靶向KDR基因的寡核苷酸,克隆进pSuper的pol IIIH I启动子的下游,重组构建抑制KDR表达的siRNA质粒,并...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2007年27期
中国组织工程研究与临床康复

血管内皮细胞生长因子受体KDR基因靶向RNA干扰质粒的构建

目的:应用RNA干扰技术设计构建针对血管内皮细胞生长因子受体KDR的小干扰RNA,并观察脂质体转染肺癌细胞A549后的干扰效果。方法:实验于2005-03/2006-01在沈阳医学院生物化学及分子生物学教研室完成。①设计针对KDR编码区有短发夹结构的3条mRNA序列,经退火成互补双链,克隆到pGCsi.H1/neo/GFP载体中构建3个重组质粒,分别命名为KDR-siRNA1、KDR-siRNA2和KDR-siRNA3。②设立5组:小干扰RNA组,分别转染KDR-siRNA1、KDR-siRNA2和KDR-siRNA3;阳性对照组,转染pGCsi.H1/neo/siGFP,该质粒载体中的插入序列为针对绿色荧光蛋白的小干扰RNA,不干扰待研究的内源性基因;阴性对照组,转染pGCsi.H1/neo/GFP/NON,该载体为不干扰任何内源性基因的小干扰RNA;空白对照组,转染pGCsi.H1/neo/GFP空载体;正常...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国现代医学杂志》2016年23期
中国现代医学杂志

缺氧对前列腺癌细胞糖酵解及迁移侵袭能力的影响

目的探讨缺氧状态下前列腺癌细胞糖酵解和体外迁移侵袭能力的改变。方法将前列腺癌细胞DU145和/或PC-3分别置于常氧及缺氧环境中培养24和48 h,侵袭小室实验检测前列腺癌细胞体外迁移及侵袭能力改变。分别检测上清液中葡萄糖含量、乳酸含量;实时定量逆转录-聚合酶链反应(q RT-PCR...  (本文共5页) 阅读全文>>

《热带医学杂志》2015年11期
热带医学杂志

前列腺癌细胞转移相关基因的筛选

目的通过对si RNA-PSMA-LNCa P、PC-3和LNCa P前列腺癌细胞株进行肿瘤转移基因芯片分析,筛选出与前列腺癌细胞转移相关的基因,并对芯片结果进行验证。方法利用肿瘤转移基因芯片技术,对si RNA-PSMALNCa P细胞株、PC-3细胞株和LNCa P前列腺癌细胞株进行肿瘤转移相关基因表达差异分析,从中筛选出可能调控前列腺癌细胞转移的基因,并利用real-time PCR的方法在前...  (本文共5页) 阅读全文>>

《药学服务与研究》2015年02期
药学服务与研究

增强多西他赛对前列腺癌细胞作用的靶点研究进展

靶向治疗是近年来前列腺癌治疗研究的热点。对分子和基因水平上发现的靶点进行治疗有望解决耐药性问题。目前,以多西他赛为基础的化疗在前列腺...  (本文共3页) 阅读全文>>

《华中科技大学学报(医学版)》2011年04期
华中科技大学学报(医学版)

PTEN增强溶瘤腺病毒对前列腺癌细胞的特异性杀伤作用

目的研究由survivin启动子调控、携带抑癌基因PTEN的条件复制型重组腺病毒对前列腺癌细胞的杀伤作用。方法构建含有survivin启动子和PTEN基因的重组腺病毒reADGL3BSurvPTEN,感染前列腺癌细胞系和正常前列腺上皮细胞系。利用Western blot检测病毒感染前后前列腺癌细胞中PTEN的表达变化,CCK-8法及流式细胞学检测重组腺病毒对前列腺癌细胞生长及凋亡的影响。结果 PCR结果证实成功构建了含有survivin...  (本文共5页) 阅读全文>>