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人骨髓间充质干细胞的分化与端粒酶活性

目的 研究人骨瞩间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)的分化特性及其端粒酶活性。方法 取人胚胎股    骨骨瞩,分离、培养、扩增MSCs,原位杂交法检测  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国矫形外科杂志》2007年16期
中国矫形外科杂志

hTERT激活人骨髓间充质干细胞端粒酶活性

[目的]明确外源性人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)能否激活人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchyme stem cell,hBMSC)的端粒酶活性。[方法]培养人骨髓间充质干细胞,采用脂质体转染法,将编码hTERT基因的真核表达质粒pCIneo-hTERT导入单克隆培养的人骨髓间充质干细胞。利...  (本文共4页) 阅读全文>>

《浙江大学学报(医学版)》2004年06期
浙江大学学报(医学版)

人骨髓间充质干细胞端粒酶活性的表达

目的 :探讨人骨髓间充质干细胞 (human mesenchymal stem cells,h MSCs)端粒酶活性的表达以及深低温冻存和向脂肪细胞诱导分化对基因表达的影响。方法 :联合应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离人 h MSCs,传代培养。深低温冻存 h MSCs或诱导其向脂肪细胞分化 ,以 TRAP(Telomerase repeatamplification protocol assay)法分别检测新鲜的不同传代次数的 h MSCs、冻存复苏后培养的 h MSCs和诱导分化为脂肪细胞的 h MSCs的端粒酶活性。结果 :用 TRAP...  (本文共5页) 阅读全文>>

《现代实用医学》2010年07期
现代实用医学

依达拉奉联合表皮生长因子诱导人骨髓间充质干细胞神经元样细胞分化中端粒酶活性的变化

目的观察依达拉奉联合表皮生长因子(EGF)诱导人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)神经元样细胞分化过程中端粒酶活性的变化。方法依达拉奉联合EGF诱导hBMSCs,观察其形态变化。免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,采用TRAP-ELISA和Western blotting分别检测...  (本文共4页) 阅读全文>>

石河子大学
石河子大学

构建永生化的人骨髓间充质干细胞

目的:构建永生化的人骨髓间充质干细胞。方法:采用阳离子脂质体介导法将病毒质粒pBabepuro-hTERT导入包装细胞内,嘌呤霉素(Puro)筛选出病毒表达阳性的细胞克隆,测定病毒滴度。取培养病毒的上清液感hBMSCs细胞、筛选出转基因细胞,我们将其命名为hTERT-hBMSCs细胞。采用端粒酶重复序列扩增(telomere repe at amplification protocol assay ,TRAP)酶链免疫吸附试验(ELISA)法检测hBMSCs细胞转染前后端粒酶活性的变化;采用MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)测绘转染前后细胞生长曲线,观察hTERT转入后对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测hTERT-hBMSCs细胞的增殖能力;染色体核型分析观察hTERT-hBMSCs细胞染色体是否正常;成骨试剂盒检测hTERT-hBMSCs细胞向成骨分化的能力。结果:骨髓间充质干细胞为贴壁生长的梭形细胞,表面抗原CD44...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国病理生理杂志》2015年03期
中国病理生理杂志

miR-486-5p通过抑制端粒酶活性促进人骨髓间充质干细胞衰老

目的:研究年龄相关microRNA-486-5p(miR-486-5p)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)衰老的调控作用。方法:通过microRNA芯片和real-time PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-486-5p表达的影响;通过转染miR-486-5p模拟物或抑制物,过表达miR-486-5p或抑制其表达;用β-半乳糖苷酶染色检测miR-486-5p对h MSCs衰老的影响;通过siRN...  (本文共5页) 阅读全文>>