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转基因克隆动物的发展及其应用

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的  (本文共4页) 阅读全文>>

内蒙古大学
内蒙古大学

转基因克隆法制作人胰岛素原牛乳腺生物反应器的研究

显微注射法的高成本、低效率长期以来制约着转基因动物研究的发展,体细胞核移植技术的出现为转基因动物的制作提供了新的思路。转基因克隆技术使用预先筛选的基因修饰细胞作为核供体,可以大大提高转基因动物的制作效率,因此这一技术一经出现就受到广泛关注,成为研究热点。理论上所有的转基因克隆动物后代都是转基因动物,但事实并非如此,许多研究表明,利用该方法培育的克隆动物后代中转基因阳性率从0%到100%都存在。本研究试图通过转基因克隆的方法制作牛乳腺生物反应器,采用绿色荧光蛋白基因和新霉素抗性基因两个标记基因与人胰岛素原乳腺特异表达载体一起构建了可以在细胞和胚胎阶段进行双重筛选的转基因载体,并转染体外培养的牛胎儿成纤维细胞,经G418筛选后选择绿色荧光阳性细胞为核供体,制作克隆胚胎,进一步筛选绿色荧光阳性囊胚进行胚胎移植,通过三次筛选以避免非转基因胚胎用于移植,节约受体动物,提高转基因克隆的效率,最终得到了妊娠的结果。1.转基因载体的构建:将以牛...  (本文共119页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

转基因克隆法制作人溶酶体β-葡萄糖苷酶奶山羊乳腺生物反应器的研究

人溶酶体β-葡萄糖苷酶(human lysosomal acidβ-glucosidase, GlcCerase)是糖蛋白降解途径的主要外糖苷酶,参与糖蛋白的回收利用。该酶减少或缺失会导致葡萄糖脑苷脂不能有效降解,在各器官中大量沉积,从而使机体发生广泛的病理变化,临床上称为“戈谢病”,酶替代法是目前该病的主要疗法。人体来源的GlcCerase获得极为困难,应用哺乳动物细胞和转基因植物表达系统生产重组人GlcCerase虽然已经有一些成功的报道,但也面临许多难以克服的问题,如在CHO细胞表达重组人GlcCerase,生产成本过于昂贵;在转基因植物中表达,存在重组蛋白质中糖链结构的改变以及下游加工处理困难等限制。如果应用转基因动物乳腺生物反应器生产重组人GlcCerase,在得到天然活性较高产品的同时,将极大地降低生产成本,具有其它表达系统所不能代替的优势。然而,显微注射法的高成本、低效率长期以来制约着转基因动物研究的发展,体细胞转...  (本文共167页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生物工程进展》2000年05期
生物工程进展

转基因克隆动物技术及其应用

克隆动物是目前生物技术领域研究的热点之一 ,其科学意义和应用价值重大。根据现有理论和技术发展趋势 ,...  (本文共3页) 阅读全文>>

《畜牧兽医科技信息》2014年07期
畜牧兽医科技信息

转基因克隆动物研究现状

对于生物领域来说,转基因克隆动物的出现,可谓是掀起了一股新的研究热潮,不仅体现了极高的科学意义,而且还存在着极强的应用价值。转基因克隆动物最引人注目的时期是在...  (本文共2页) 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

转基因克隆山羊印记基因、DNA甲基化结合蛋白与组蛋白去乙酰化酶表达的研究

转基因克隆山羊在医药、畜牧业和生物材料等领域具有广泛的应用前景。虽然制备转基因克隆动物的方法很多,但体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)方法由于可以在细胞水平上进行基因修饰和阳性细胞筛选,是目前最常用的一种方法。近年来,本实验室采用SCNT方法获得了批量转人乳铁蛋白(human lactoferrin,hLF)基因的克隆山羊,但总体效率仍然不高。转基因克隆胎儿在附植期或围产期容易发生流产,部分活产的克隆动物也表现出发育异常而导致存活率低。目前普遍认为,转基因克隆效率低下主要是由于供体细胞核不能被卵胞质完全重编程所致。因此,本研究拟由表观重编程入手,从印记基因、DNA甲基化结合蛋白以及组蛋白去乙酰化酶等多个角度研究和分析引起转基因克隆山羊发育异常的原因,为提高转基因克隆效率提供理论参考。1.转基因克隆山羊肺脏组织中发育相关基因表达的研究新生死亡的转基因克隆山羊多表现出肺脏发育异常。因...  (本文共150页) 本文目录 | 阅读全文>>