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IBV结构蛋白的研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchi-tis virus,IBV)是冠状病毒中的一种,其主要的结构  (本文共2页) 阅读全文>>

四川农业大学
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禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合DNA疫苗构建及免疫研究

禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是危害养鸡生产重要的病毒性传染病之一。由于禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱,而常规疫苗常引起IB的免疫失败。因此,从基因水平上研制DNA疫苗等新型基因工程疫苗,对提高IBV免疫保护具有重要意义。在前期研究基础上,本研究对IBV肾型SAIBk株结构蛋白的抗原表位进行系统分析预测,筛选出IBV S1、S2和N蛋白的抗原表位片段,构建含鸡属特异性CpG基序的IBV多表位嵌合基因,将嵌合基因进行原核表达并建立了检测IBV抗体的间接ELISA方法,构建了多表位嵌合基因的真核表达质粒,并结合禽白细胞介素分子佐剂对其免疫效果进行了比较研究,为研制安全、高效的新型IBV DNA疫苗提供了新的方法。1、采用生物信息学软件及相关网站分析IBV S1、S2和N结构蛋白的二级结构、B细胞表位(主...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
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禽传染性支气管炎病毒基因双顺反子DNA疫苗及mRNA3的分子特性研究

1、本研究采用PCR扩增获取鸡的IL-2、IL-18基因,将其插入pMD18-T载体中进行测序鉴定。对含有S1、M、N目的基因的pIBVS1、pIBVM、pIBVN质粒进行测序分析。结果表明,IL-2、IL-18、S1、M、N基因全长分别为432bp、536bp、1671bp、678bp和1230bp,鉴定的目的基因正确。以pDsRed-Express-N1载体为骨架,以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site)序列为连接元件构建绿色和红色荧光基因的双顺反子表达质粒pIRES-EGFP/Red,转染Vero细胞后观察到绿色和红色荧光基因均获得表达。构建的pIRES-EGFP/Red载体含有卡那霉素抗性基因,比含有氨苄抗性的双顺反子载体具有更高的生物安全性,为今后开展各种病原微生物双顺反子DNA疫苗的研制提供研究工具。2、用S1、M、N基因与IL-2、IL-18基因分别替换pIRES-EGFP/...  (本文共160页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
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鸡传染性支气管炎病毒LX4株主要结构基因的研究

细菌、病毒等所产生的生物性毒物对机体的代谢、繁殖机能有着重要的影响,目前对细菌毒素的研究比较透彻,已经上升到分子水平,特别是通过病原微生物全基因组序列的测定,使人们从更高层次上把握病原微生物的致病机理及其规律成为可能。到目前为止,已完成了近10个细菌全基因组序列的测序工作,更多细菌的全基因组序列正在进行中。细菌全基因组序列测序工作的完成将给人类分析和研究编码细菌毒性蛋白的毒力基因、认识和阐明毒性蛋白的毒理带来新的机遇。而对病毒这方面的研究相对滞后,为了探讨病毒对细胞、组织的毒性作用及其毒理,分析病毒基因组中主要结构基因在致病和免疫中的功能,研制阻断病毒与细胞融合的药物及其有效的疫苗,为其防制提供全新的思路,就必须以基因组的分析为基础。本研究首先分离鸡传染性支气管炎病毒我国地方流行毒株(IBV-LX4),然后进行形态学和生物学特性的鉴定并进行蚀斑纯化。在此基础上,根据国内外已发表的IBV基因序列,分别设计特异性引物,应用不同引物进...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
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泛素介导IBV结构蛋白重组质粒的免疫效应及其“Prime-boost”免疫效果的研究

鸡传染性支气管炎(IB)是一种由γ冠状病毒类的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的具有高度接触性传染性疾病。IB呈世界范围内流行,进化过程中易变异,特别是RNA依赖的RNA聚合酶的特殊复制机制,使得IBV基因组发生高频率的碱基缺失、插入以及野毒株之间、疫苗毒株与野毒株之间的重组事件,从而产生多种血清型或变异新型,不同病毒株之间交叉保护力弱,给世界养禽业造成了巨大的经济损失。IB的防控主要依赖使用灭活疫苗和弱毒疫苗,但常常还有免疫失败的报道。因此急需研制新型疫苗以及对已有的疫苗进行免疫策略的优化,达到增强疫苗抗病毒效应的目的。采用本课题组构建的重组质粒按常规方法进行制备并制成DNA疫苗。在动物实验中设计7个组即pVAX1-Ub-linker-N + pVAX1-Ub-linker-N免疫组、pVAX1-Ub-linker-S1 +pVAX1-Ub-linker-S 免疫组、pVAX1-Ub-linker-N-S1+pVAX1-Ub...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)全结构蛋白基因的克隆和序列分析

实验选取了一株分离自有腺胃病变的较为特殊的传染性支气管炎病毒(IBVSD/97/02株)作为基本材料,对该毒株的生物学特性和分子生物学进行了研究。利用RT-PCR技术克隆了此毒株的所有结构蛋白(S1、S2、M、N)基因,并对这些基因的序列进行分析。内容包括:1.将病毒通过9-11日龄鸡胚盲传5-6代,用动物回归和免疫保护试验进行了毒株的基本特性的研究,用气管环组织培养对病毒进行理化特征测定、毒价测定与中和试验,初步证明目前流行的以腺胃肿大为主要特征的传染病的病原是冠状病毒,由于该病引起腺胃的特征性病理变化,所以将该病暂定名为腺胃型传染性支气管炎,并将该青岛分离株定为SD/97/02株。2 参考Genbank发表的IBV S1纤突蛋白基因序列,自行设计合成了一对引物,对传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)RNA进行RT-PCR扩增。产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现一条1657 bp的条带,将其克隆入pMD18-T载体...  (本文共113页) 本文目录 | 阅读全文>>