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海洋真菌Fusariumsp.LD8岩藻多糖酶的液态发酵条件研究

通过对海洋真菌Fusariumsp.LD8产岩藻多糖酶发酵培养基组成及工艺条件的研究,得到较优培养基配方为:麸  (本文共6页) 阅读全文>>

大连海洋大学
大连海洋大学

岩藻多糖降解酶的克隆表达与酶学性质研究

低分子量的岩藻多糖(LMWF,low molecular weight fucoidan)的应用前景吸引了人们的广泛关注,然而低分子量岩藻多糖的制备及商品化的岩藻多糖降解酶酶制剂的缺乏制约了其在医药、食品、化妆品等领域的大规模应用。海洋微生物是岩藻多糖降解酶的重要来源,筛选岩藻多糖代谢新菌株,对发掘具有潜在产业化价值的岩藻多糖降解酶具有重要意义。自大连长兴岛采集的样品中筛选获得8株能够利用岩藻多糖的菌株。其中菌株2-8发酵液酶活力相对较高(0.15 U/mL)。基于形态观察以及系统生物学分析,菌株2-8被鉴定为蜡样芽胞杆菌,命名为Bacillus cereus 2-8。根据NCBI数据库中岩藻多糖降解酶的信息,以Bacillus cereus 2-8作为研究对象,设计简并引物,通过基因工程技术获得目的基因BcFucA,并将其构建到pET21a质粒上,在大肠杆菌中胞内表达后获得具有6×His标签的重组蛋白质BcFucA,镍柱亲和层...  (本文共90页) 本文目录 | 阅读全文>>

《食品工业科技》2019年09期
食品工业科技

岩藻多糖结构对其功能的影响研究进展

岩藻多糖是一种富含硫酸基的多聚糖,广泛存在于褐色海藻中。由于其广泛的生物活性功能,如抗氧化、提升免疫力以及抑制肿瘤等,从而逐渐成为目前研究的热点。天然来源的岩藻多糖由于分子聚合度较高,从而...  (本文共6页) 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

一株海洋细菌基因组文库的构建及岩藻多糖酶基因的筛选

岩藻多糖酶能水解岩藻多糖生成低分子量的岩藻多糖,低分子量的岩藻多糖具有溶解性大、吸收好、抗肿瘤、增强机体免疫等多种生理功能,在医疗和保健方面具有广阔的开发和应用前景。用岩藻多糖酶制备低分子量岩藻多糖,过程安全,反应条件温和,对设备要求不高;专一性强,产物较纯净,便于分离提纯精制;对原料要求不高。但从自然环境中获得天然岩藻多糖酶较难,工艺复杂,因此研究岩藻多糖酶基因,从基因水平来调控表达岩藻多糖酶就具有深远的意义。本文以海洋细菌ZJCN121为材料,按照分子生物学技术构建其基因组文库。采用SDS-PAGE蛋白质电泳初步估计ZJCN121菌株产岩藻多糖酶的分子量。采用CTAB/NaCl法提取ZJCN121菌株的基因组DNA,用1.5μLHindⅢ于37℃部分酶切7μL基因组DNA2min,用SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒回收纯化3-8kb的酶切DNA片段,然后与载体pET-32a连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。随机挑选转...  (本文共54页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

海洋镰孢霉岩藻多糖酶的制备、酶学性质及表征

岩藻多糖是褐藻中所特有的杂多糖,它属于异多聚碳水化合物,具有生理功能,特别是低分子量岩藻多糖具有很强的生物学活性,其活性与其分子结构和分子量大有关,分子量在8,000~100,000范围内有明显的生理作用,低分子量岩藻多糖生理功能主要表现在抗凝血和抗血栓作用,此外还具有抗肿瘤、消炎等作用。岩藻多糖酶可部分降解岩藻多糖得到低分子量组分。因此,对岩藻多糖酶的研究具有十分重要的意义。本实验以海洋真菌LD-8为出发菌株,通过菌种的复壮,固态发酵,制备出岩藻多糖酶发酵液,经丙酮沉淀及Sephadex G-100层析后提纯倍数为22.7,收率为23.9%。纯化后的岩藻多糖酶,在聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳、等电聚焦电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳均显示一条单一的色带,证明其组分单一。得其等电点为4.5,分子量为64,000道尔顿。酶学特性研究结果表明:LD8菌产岩藻多糖酶最佳时间为48h,酶的最适反应温度为60℃;将酶液分别放置于不同温度下保温1...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

辽宁师范大学
辽宁师范大学

低聚岩藻多糖的制备及抗寒诱导效应研究

植物寒害对农业生产有很大的影响,寒害大规模爆发严重影响农作物的产量和品质,造成很大的经济损失,因而研制出实用有效的抗寒药剂显得尤为迫切。植物可以通过诱导产生抗寒性,低聚糖是一种有效的诱导子,可以诱导植物防卫反应的发生。本文以海带为材料,制备低聚岩藻多糖(FO),用于诱导植物抗寒性的研究,结果如下:(1)从海带中用酸提-乙醇沉淀法得到岩藻多糖粗品,经DEAE-纤维素离子交换层析纯化,得岩藻多糖纯品。岩藻多糖纯品用稀盐酸部分降解,降解产物经过SephdexG-25凝胶过滤,得到平均聚合度为8—20的低聚岩藻多糖。(2)用0.01-0.1%浓度范围内的低聚岩藻多糖浸种,提高了白菜、玉米及番茄种子的发芽率、发芽指数、苗高、苗鲜质量及活力指数,其中0.1%低聚岩藻多糖作用效果最佳。但随着浓度的升高,作用效果与低浓度的相反,抑制种子萌发和幼苗生长。(3)0.01%-0.2%浓度范围内的低聚岩藻多糖处理后,均能提高植物幼苗的抗寒性,低聚岩藻多...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>