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λ噬菌体DNA的制备

本文报导了一种较为简单的入噬菌体DNA制备方法.首先在LB琼脂平皿中扩增噬菌体,待取得1×10~(11)噬菌体后进行  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国医学科学院学报》1984年06期
中国医学科学院学报

λ噬菌体包装蛋白的制备与λ-DNA的体外包装(简报)

构建基因文库是研究真核基因结构与功能以及人类遗传性疾病分子基础...  (本文共1页) 阅读全文>>

国家海洋局第三海洋研究所
国家海洋局第三海洋研究所

海洋高温噬菌体非特异性核酸酶及溶原相关蛋白的性质研究

随着工业生产对热稳定生物催化需求的增加,嗜热微生物作为有价值的酶的来源越来越引起人们的重视。本试验中,一种新的非特异性核酸酶GBSV1-NSN从海洋嗜热细菌噬菌体GBSV1中第一次被发现,它与已知的核酸酶氨基酸序列没有明显的同源性。GBSV1-NSN在Escherichia coli中重组表达纯化后,呈现出非特异性核酸酶的性质,能够降解各种类型的核酸,包括环状双链DNA、线状双链DNA、单链DNA和RNA。核酸酶GBSV1-NSN的最适反应温度是60℃,最适pH是7.5,它的活性被EDTA、2-ME、SDS、citrate、guanidine hydrochloride、urea和DTT抑制,相反被Tween 20、Chaps和Triton X-100增强。它对不同的底物具有不同的Km ,双链DNA是231μmol/L,单链DNA是61μmol/L,RNA是92μmol/L。综上所述,它的发现对于科学研究和应用具有重要的意义。在...  (本文共106页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

武夷菌素生物合成基因簇的克隆及分析

武夷菌素(Wuyiencin)是由不吸水链霉菌武夷变种(Streptomyces ahygroscopicus var. wuyiensis)产生的一种新型农用抗生素,对多种真菌性病害具有良好的防治效果。采用物理化学诱变的方法选育武夷菌素高产菌株虽然取得了一些进展,但仍不能满足育种和生产上需要。因此,采用分子生物学方法提高武夷菌素效价具有非常重要的意义。本研究构建了武夷菌素产生菌基因组文库,克隆武夷菌素生物合成基因簇并且分析了其功能。此外利用诱变的方法筛选到了武夷菌素生物合成阻断突变株。结果如下:1.采用pCC1FOS为载体构建了不吸水链霉菌武夷变种基因组文库,文库滴度为8.8×10~5 cfu/ml,文库可覆盖基因组4倍以上。根据同类型抗生素生物合成基因设计特异性引物,最终确定以大环内酯类聚酮合成酶基因设计的引物筛选基因组文库。2.采用PCR方法对基因组文库进行筛选得到了三个阳性克隆,对阳性克隆酶切后测序最终得到了长度为325...  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

茶树BAC文库构建与相关基因克隆的筛选及测序

茶树(Camellia sinensis)是一种重要的经济作物,它的经济价值不仅体现在茶叶上,茶树花、果实也有很高的经济价值。茶被誉为“世界三大无酒精饮料之一”,现已成为世界上流行的保健饮品。随着生物技术的发展与应用,关于茶树的科学研究已经逐渐深入至分子生物学水平,茶树基因的分离与克隆已成为分子生物学研究的重要内容。本课题是与安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室合作完成,以茶树品种“舒茶早”植株为材料构建茶树BAC(bacterial artificial chromosome)文库。该文库含有161,280个克隆,保存在420块384板中。随机挑选450个BAC克隆检测DNA插入片段,片段大小集中在100~130 kb之间,平均插入片段约为113 kb,空载率小于2.5%,以茶树基因组2.9 Gb计算,该文库大约覆盖整个茶树基因组6.2倍。随机挑选48个BAC克隆测BAC末端序列,参考NCBI数据库中茶树细胞器基因组...  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

西南农业大学
西南农业大学

家蚕AFLP图谱的构建和天蚕卵黄原蛋白基因的克隆

家蚕是遗传学上具有重要地位的模式生物,是生物工程研究的理想材料,也是一种重要的经济昆虫,在我国的国民经济中占有极为重要的地位。家蚕分子连锁图谱的构建对促进家蚕分子生物学的研究和分子辅助育种具有重要的意义。利用分子标记技术寻找绿茧基因紧密连锁的分子标记,对绿茧基因进行定位,加速优质绿茧蚕品种的育成是十分迫切而必要的。天蚕蛾科的昆虫是目前所记载的鳞翅目昆虫中产卵最大的种类,这些昆虫卵的形成中,卵黄的形成和卵巢的发育相当活跃,其卵巢是生理学、生物化学及分子生物学上研究发育过程所期望的模式系统,对其卵的形成的研究具有重要意义。本实验利用天蚕基因组文库等,克隆了卵黄蛋白主要组分的卵黄原蛋白的全基因。主要结果如下:1 家蚕AFLP图谱的构建扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,简称AFLP)技术是一种具有稳定性好和多态率高的优点的DNA指纹分析技术。目前已广泛应用于多种生物的连锁图...  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>