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人内皮抑素在家蚕细胞和幼虫中的表达

将人内皮抑素(Endostatin)基因重组于家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,获得重组转移载体pBacPAK-Endo,并与修饰性线性化病毒 Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕培养细胞,二者在细胞内发生同源重  (本文共4页) 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

人内皮抑素在家蚕培养细胞和幼虫中表达的研究

人内皮抑素(Eondostatin)是新发现的一种对血管内皮细胞增生有强烈抑制作用的因子。重组人内皮抑素在动物模型试验中,对患四种不同肿瘤的小鼠均有明显地抑制肿瘤细胞生长的功效,无任何毒副作用,且反复用药后也未发现有任何耐药性,显示了其在抗肿瘤临床应用的喜人前景。目前人内皮抑素在美国已经进入了Ⅰ期临床试验。昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS)是八十年代发展起来的真核表达系统至今己有上千种来源于不同物种的基因在该系统中得到高效表达,而家蚕杆状病毒(BmNPV)表达系统又有其独特的优势。在本实验中,人内皮抑素cDNA被克隆至转移载体pBacPAK8中,使其置于多角体蛋白(polyhedrin,ph)基因启动子控制之下,获得重组转移载体pBacPAK-Endo。重组转移载体DNA与经Bsu36I酶切线性化的修饰型病毒 Bm-BacPAK DNA共转染家蚕 BmN细胞,然后经空斑纯化、PCR扩增、DNA点杂交等方法鉴定出含Endosta...  (本文共67页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林农业大学
吉林农业大学

猪伪狂犬病病毒流行变异株JL1株分离鉴定及gE基因缺失转移载体的构建

近年来,猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)在国内许多Bartha-K61疫苗免疫的猪场大规模爆发,相关研究表明,引起该病大规模爆发的病原为发生变异的猪伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV),多数猪场的PRV野毒感染普遍存在。该病传播迅速,严重危害我国养猪业的发展,引起人们的广泛关注。本研究对从吉林省某疑似PR发病猪场采集的病料进行病毒分离鉴定,分离出一株PRV JL1株,对该毒株的主要基因进行遗传变异分析,以进一步了解PRV遗传变异情况。同时,以分离的JL1株为亲本株,构建gE基因缺失转移载体,以期为后续构建PRV gE基因缺失株打下基础。研究内容分为以下3部分:1.PRV流行变异株JL1株的分离鉴定采集吉林省某疑似猪伪狂犬病发病猪场的组织样品,经研磨处理后,将采集的病料接种于ST细胞进行病毒分离,24h后在接种脾脏上清的细胞中可见细胞聚集、融合等细胞病变。PCR检测和序列测定结果表明,分离的病毒为...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国预防兽医学报》2003年01期
中国预防兽医学报

伪狂犬病病毒通用转移载体的构建及应用

将来自质粒pFSV40的 3 0 0bpBamHI/PstI片段〔其中含有SV40poly(A)和部分多克隆位点〕插入到质粒pUSK相应的酶切位点中 ,获得重组质粒pUSKSV40 ,该重组质粒中gG基因 5’端编码区缺失了 42 8bp。将来自质粒pcDNA3 .1( +)的 946bpBglIIEcoRI片段 (其中含CMV启动子及部分多克隆位点 )插...  (本文共5页) 阅读全文>>

《图书馆理论与实践》2011年03期
图书馆理论与实践

知识转移载体论

按照知识状态的不同,可以把知识分为接受状态的知识、记录状态的知识和传递状态的知识。传递状态的知识就是在流动转移过程中的...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国蚕业》2011年03期
中国蚕业

类芋螺毒素基因的克隆及其斜纹夜蛾重组杆状病毒转移载体的构建

设计一对特异性的引物,以苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组为模板,经PCR克隆出类芋螺毒素基因(ctx-like gene)作为重组病毒的外源基因,并在具有强毒力的斜纹夜蛾核型多角体病毒株(SpltM...  (本文共6页) 阅读全文>>

《西安交通大学学报(医学版)》2006年05期
西安交通大学学报(医学版)

新型EGFP标记的杆状病毒转移载体的构建及EGFP的制备

目的构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP。方法用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转化E.coli...  (本文共5页) 阅读全文>>