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基因工程在果树上的研究进展

综述了近年来国内外果树在基因工程方面的研究进展。基因工程主要应  (本文共1页) 阅读全文>>

福建农林大学
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香蕉根癌农杆菌介导ACS反义基因遗传转化及ACS基因克隆

本研究以香蕉(Musa spp.)品种“天宝蕉”(Musa spp ., AAA类群)新株系TY1和孟加拉粉大蕉(Musa spp., ABB类群)为试验材料,采用根癌农杆菌介导法对不同基因型香蕉遗传转化体系进行研究,并以天宝蕉叶片为材料进行ACS基因的克隆研究,为构建自身反义基因表达载体,进行“自体转化”奠定基础。主要研究内容包括:①香蕉离体再生体系的优化研究;②根癌农杆菌介导ACS反义基因转化香蕉研究;③筛选抗性芽和诱导植株再生、并对再生植株进行检测研究;④初代转基因试管苗的继代增殖和移栽;⑤天宝蕉叶片ACS基因保守区序列的克隆研究。主要研究结果如下:1.香蕉离体再生体系的优化研究试验以“天宝蕉”新株系TY1和孟加拉粉蕉吸芽为外植体,对离体再生进行研究,优化离体再生条件。在生长旺盛期(如4~5月)进行取材,外植体采用0.1 %升汞+3~5滴吐温(Tween-80)消毒效果最好;消毒后的外植体先经过MS液体培养基培养1-2周后...  (本文共141页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
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PSP驱动CAPD基因的植物表达载体构建及在果树中的遗传转化研究

我国是一个水果生产大国,栽培面积和产量均雄踞世界前列,但各种检疫性、毁灭性的病害(如柑桔黄龙病、香蕉枯萎病和猕猴桃溃疡病等)时刻威胁和制约着生产的发展。培育抗病品种是解决问题的根本途径,但由于抗性资源缺乏且大部分果树存在高度杂合、倍性复杂、育种周期长等问题,杂交育种等传统的抗病育种手段难以奏效。现代生物技术的飞速发展为果树抗病育种提供了新的途径,它可以获得常规育种难以得到的新类型,从而创造出新种质。迄今为止,绝大部分果树抗病基因工程育种采用的启动子是组成型的花椰菜花叶病毒35S启动子,采用的目的基因是来源于微生物或动物、没有经过密码子优化的抗性基因,安全性、专一性和表达效率存在问题。本试验针对果树上存在的一些韧皮部传导的毁灭性病害(如柑桔黄龙病、香蕉枯萎病等),首先从笋瓜中克隆了一个韧皮部特异性启动子,并根据密码子用法分析结果,重新设计和合成了对这些毁灭性病害有杀灭作用的柞蚕抗菌肽D基因,然后构建了多种由不同启动子驱动标记基因或...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

标记基因的克隆、化学合成和体外定向分子进化及其在果树基因工程中的应用研究

标记基因是一种用来筛选和鉴定转化细胞、组织和转基因植株的DNA片段,包括起富集转化细胞作用的选择基因和易于检测表达产物的报告基因。抗生素类和抗除草剂类是当前转基因作物中采用的选择标记基因。目前常用的报告基因主要包括β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、β-半乳糖苷酶基因(LacZ)、荧光素酶基因(Luc)、绿色荧光蛋白基因(gfp)和冠瘿碱合成酶基因等。植物转基因中最广泛应用的报告基因是gus。转基因作物进入商业化生产阶段,其外源基因的逃逸是不可避免的。因此使用安全的标记基因和报告基因是一个很好的选择。体外定向分子进化是发现和改造生物活性分子的重要方法,提供了一种高效获得多样性的方法。DNA改组是重要的体外分子进化技术,结合高通量筛选在农业、环境污染治理、化学工业、基因治疗、疫苗、蛋白药物等方面有着广泛的应用。近年来,许多体外分子进化的新策略和新方法层出不穷。DNA改组技术的发展和成熟是在上世纪九十年代末期。特别是进入21世纪以来,体...  (本文共167页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建农林大学
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龙眼体胚发生系统的优化及其在种质保存与遗传转化上的应用

龙眼(Dimocarpus longan Lour.)是我国南方大面积种植的重要热带亚热带果树。本研究主要以长期保存的龙眼胚性培养物为材料,对以下6个方面进行研究:①对三种类型龙眼EC进行限制生长保存条件的优化;②17个龙眼品种的体胚发生以及植株再生;③选择并优化龙眼愈伤组织转基因受体系统;④采用根癌农杆菌介导法进行ACS反义基因转化龙眼并优化转化体系;⑤对抗性龙眼EC进行筛选并进行其生长状况观察;⑥对转ACS反义基因的抗性EC进行GUS稳定表达检测和GUS基因的PCR检测。主要研究结果如下:1三种类型龙眼胚性愈伤组织限制生长保存条件优化试验比较了不同浓度山梨醇、甘露醇、PEG、肌醇、麦芽糖以及光质的差异对三种类型龙眼胚性EC生长的影响,并对上述三种类型龙眼EC最佳保存条件进行验证。试验结果表明: CⅢI和CⅡa两种类型的龙眼EC在相应的培养基中可以将其保存时间延长到60d,CⅡb也能够将其保存时间延长到50d,并且能够保持旺盛...  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

河南农业大学
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猕猴桃、枣高效再生体系的建立及农杆菌介导的遗传转化研究

猕猴桃(Actinidia)果实风味独特,营养丰富,被誉为“水果之王”。枣(Zizyphus jujuba Mill.)是我国第一大干果树种。猕猴桃属雌雄异株,遗传背景复杂;枣花蕾小、自然坐果率低、胚败育率高等因素,传统杂交育种方法存在周期长、效率低等问题,获得优质多抗的猕猴桃、枣新品种困难重重。基因工程的发展为猕猴桃、枣的育种工作开辟了一条新的途径。本研究以河南特异红果肉猕猴桃资源中华猕猴桃‘伏牛95-2’(Actinidia chinensis'Funiu95-2')为材料,建立了中华猕猴桃‘伏牛95-2’高效再生体系、遗传转化体系,且获得了转抗菌肽D基因的转基因植株,PCR检测、Southern杂交检测证明外源基因已整合到猕猴桃基因组中。灰枣遗传转化研究,本试验以灰枣(Zizyphus jujuba 'Huizao')为材料建立了灰枣组培快繁体系、叶片直接再生体系及对灰枣遗传转化进行了初步探讨。主要结果如下:1.以中华猕猴...  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>