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人Elongator复合物Elp3亚基基因可显著补偿酵母elp3缺失菌株的生长缺陷

从HeLa细胞中分离的人的Elongator复合物在组成及与RNAPⅡ的作用方式上与酵母的E- longator复合物十分相似,但对其功能研究极少。为了研究人的Elongator复合物催化亚基Elp3的功能,将人elp3等基因转入酵母elp3基因缺失的突变菌株(elp3Δ菌株),并对转化菌株进行功能互  (本文共8页) 阅读全文>>

《细胞生物学杂志》2005年06期
细胞生物学杂志

Elongator复合物:一种新的参与转录延伸的组蛋白乙酰转移酶

由6个亚基组成的Elongator复合物是RNA聚合酶II(RNApolymeraseII,RNAPII)全酶的一个重要组成部分,它可以与高度磷酸化的...  (本文共3页) 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

Elongator对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的:通过研究Elp3过表达和Elp3干扰表达的HepG2细胞株以及Elp4过表达和Elp4干扰表达的HepG2细胞株的迁移侵袭能力的改变,探讨Elp3和Elp4对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法:1.鉴定Elp3干扰质粒GV248-Elp3i和Elp4干扰质粒GV248-Elp4i,以及Elp3过表达质粒pFLAG-CMV4-Elp3o和Elp4过表达质粒p FLAG-CMV4-Elp4o。2.确定肝癌细胞HepG2的Puror和G418药物筛选浓度。3.转染干扰质粒后的Hep G2细胞经Puror筛选得到Elp3稳定干扰细胞株和Elp4稳定干扰细胞株;转染过表达质粒后的HepG2细胞经G418筛选得到Elp3过表达稳定细胞株和Elp4过表达稳定细胞株。4.通过RT-PCR、Real-time PCR和Western blot鉴定各组细胞株中外源质粒的整合,检测Elp3和Elp4的mRNA和蛋白表达水平。5.划痕...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)

拟南芥26S蛋白酶体途径和转录延伸因子Elongator调控叶片近轴面—远轴面极性建成的研究

第一部分:拟南芥26S蛋白酶体途径促进叶片近轴面极性的建成极性建立是叶片形态发育的前提,近年来,一些参与叶片近远轴极性建成的重要基因已被发现和报道,其中拟南芥的ASYMMERTIC LEAVES1和2 (AS1和AS2)是叶片近轴面的重要决定因子。本文研究的是一个as2的增强子——asymmetric leaves enhancer3 (ae3),ae3突变体表型多效,单突变的一些叶片就表现出近轴面特征的缺陷,而ae3 as2双突变则完全形成远轴面化的叶片,这种异常的叶片伴随着促进叶片远轴面极性建成的基因——YABBY家族和KANADI家族基因的上调,而那些促进叶片近轴面特征的基因如REVOLUTA被下调。通过对AE3基因的图位克隆,发现它编码了一个26S蛋白酶体的亚基RPN8a。此外,其它26S蛋白酶体亚基的突变体如rpt2a, rpt4a, rpt5a, rpt1a, rpn1a, rpn9a, rpn2a, rpn10, ...  (本文共115页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

Elongator对肝癌细胞DNA损伤修复的影响及其分子机制的研究

目的:在肝癌细胞HepG2中,研究Elp3和Elp4在~(60)Coγ射线辐照引起的DNA损伤修复中的功能,并对其分子机制进行探讨。方法:1.以OTM为指标,通过彗星电泳检测抑制剂LY294002处理的辐照后各组细胞的损伤情况。2.通过流式细胞仪检测抑制剂LY294002处理的辐照后各组细胞的凋亡率。3.通过CCK8检测抑制剂LY294002处理的辐照后各组细胞的增殖情况。4.通过Western blot检测抑制剂LY294002处理的辐照后各组细胞中RAD50、Ku70、Mre11这些损伤修复相关蛋白的表达情况。5.通过裸鼠皮下移植瘤实验,检测Elp3对移植瘤生长的影响。6.免疫组织化学法检测移植瘤中损伤修复、增殖、凋亡这些相关基因的表达。结果:1.LY294002处理组与对照组相比较,HepG2组、Elp3过表达组和Elp4过表达组中OTM值显著增加,而Elp3干扰组和Elp4干扰组中OTM值没有显著变化。2.LY29400...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生命科学仪器》2017年02期
生命科学仪器

Elongator复合物在低浓度氨基酸条件下对TORC1活性的影响

目的:研究Elongator复合物在低浓度氨基酸条件下对TORC1活性的影响。方法:通过生长实验来观察Elongator突变体在低浓度氨基酸和低浓度亮氨酸条件下的生长程度;通过免疫印迹法检测核糖体蛋白S6的磷酸化水平来检测TORC1的活性;将GFP-ATG8质粒转入到Elongator突变体及野生型酵母菌株WT里,并通过免疫印迹法检测游离的GFP蛋白的水平来检测体内...  (本文共8页) 阅读全文>>