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细胞ELISA法的建立及应用

应用刀豆素蛋白A为结合剂将细胞结合于酶标板的细胞ELISA法(C-ELISA),检测  (本文共3页) 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

鸭瘟病毒UL51基因部分特性及其基因工程蛋白应用的研究

1鸭瘟病毒U151基因的序列特征分析及密码子偏爱性分析根据本实验室构建的鸭瘟病毒(DPV) DNA文库,并结合NCBI中的开放阅读框(ORF) Finder和BLAST工具进行分析,一个完整的ORF被鉴定出来。该ORF是DPV UL51基因(GenBank No.DQ072725),大小为759bp,编码一种皮层蛋白,并且含有一个在α-疱疹病毒亚科中保守的区域。进化关系分析揭示DPV UL51基因与马立克属疱疹病毒UL51基因的进化关系最近。之后,对该基因编码蛋白序列进行了一系列生物信息学分析,结果显示,该蛋白含有4个潜在的磷酸化位点、,1个潜在的酰基化位点和4个潜在的线性B细胞表位,表明它可能是一种磷酸化和酰基化的蛋白,并且能够诱导较强的免疫反应;同时,该蛋白不含任何的N-糖基化位点、跨膜区域、信号肽和核定位信号,却含有高尔基体定位信号,表明它可能定位于胞浆的高尔基体中。对DPV UL51基因密码子偏爱性分析的结果揭示,该基因...  (本文共188页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国人兽共患病杂志》2002年04期
中国人兽共患病杂志

测定小鼠细胞因子的双抗体夹心ELISA法的建立及应用研究

目的 建立敏感的测定小鼠IL - 5、IL - 4和IFN -γ水平的生物素 -链霉亲和素双抗体夹心ELISA法 ,并探讨该法在IL - 5转基因小鼠感染模型中的应用价值。方法 含大鼠抗小鼠IL - 4、IL - 5和IFN -γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清 ,经PM 10膜超滤、5 0 %饱和硫酸铵沉淀及ProteinG -Sepharose亲和层析纯化。应用活化生物素制剂对纯化的TR FK4、...  (本文共3页) 阅读全文>>

北京中医药大学
北京中医药大学

嘌呤生物碱类化合物茶碱-7-乙酸、theacrine和咖啡因的ELISA方法的建立及应用

嘌呤生物碱是一类小分子量的含氮化合物,广泛分布于自然界多种植物中。该类化合物的药理作用复杂多样,已有多种化合物被开发为临床药物,如咖啡因,茶碱等。因此,建立嘌呤生物碱类化合物的生物样品含量的检测方法具有重要意义。目前,对嘌呤生物碱类化合物在生物样本中的常用检测方法,包括HPLC、LC-MS等,需要较为繁琐复杂的样品前处理过程,仪器设备较为昂贵,且对样品检测无法做到高通量的同时检测。而利用嘌呤生物碱类化合物的单克隆抗体建立的酶联免疫吸附法(enzeyme-linked immunosorbent assay, ELISA),具有检测生物学样品前处理简单、仪器设备价格低廉、实验耗材成本低的特点,可以对样品中的微量、痕量嘌呤生物碱成分进行高通量同时检测。本课题选择嘌呤生物碱类化合物茶碱-7-乙酸(theophylline-7-acetic acid,7-TAA)作为半抗原,制备了抗7-TAA的单克隆抗体,并建立了7-TAA、theac...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

郑州大学
郑州大学

血清甲胎蛋白胶体金免疫层析快速检测法的建立及其在肝细胞肝癌诊断中的应用

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一。目前,HCC的主要治疗方法仍然是外科手术切除,影响术后生存率的关键因素是早期发现、早期诊断、早期治疗。定期对HCC高危人群进行血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)检测和影像学检查是早期发现HCC病人的最佳方法。本研究利用细胞融合技术建立分泌抗AFP单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的杂交瘤细胞株,经过系列鉴定,挑选出两株特异性强、亲和力高、针对AFP分子上不同抗原决定簇的McAb 1E_6和3A_8,分别用于标记纳米级的胶体金颗粒和包被微孔硝酸纤维膜(nitrocellulose membrane,NCM),并结合层析郑州大学2002年硕士论文 血清甲胎蛋白胶体金免疫层析诀速检测法的建立及其在肝细胞肝癌诊断中的应用技术制备检测血清 AFP的胶体金免疫层析分析*olloidal...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

羊口疮抗体ELISA检测方法的建立及应用

羊口疮,是由痘病毒科副痘病毒属的羊口疮病毒感染引起的人畜共患传染病,能引起山羊采食、吮乳困难而影响患羊增重或继发其他感染而死亡,给养羊业造成很大经济损失。许多研究结果显示,体液免疫在羊口疮免疫防御中发挥着很重要的作用。因而建立羊口疮抗体的ELISA检测方法对于羊口疮疫苗的免疫效果评估、羊口疮流行病学调查等有着重要的应用价值。羊口疮病毒表面囊膜蛋白B2L、肝素结合蛋白(F1L)和干扰素连接蛋白(VIR)在不同羊口疮病毒株中高度保守,并能刺激机体产生抗羊口疮病毒的抗体,因而本研究选其作为间接ELISA检测方法的候选包被抗原。本研究根据NCBI中已公布的B2L、F1L和VIR基因序列设计引物,通过PCR进行这三个基因的克隆,并将其与pGEM-Teasy载体连接转化到DH5α感受态细胞中,构建克隆质粒,测序。测序结果使用DNAstar软件分析基因的核苷酸和氨基酸序列,使用SignalPversion3.0预测有无信号肽,使用稀有密码子预...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>