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苏云金芽孢杆菌cry1Ab13基因的克隆及表达研究

BtC0 0 5是我国自行分离的对多种害虫具有毒杀作用的苏云金芽孢杆菌 ,经PCR RFLP系统鉴定 ,它含有cry1Ab基因。Southernblot结果显示 :PstI酶切C0 0 5质粒所得的 8 5kb长的DNA片段为cry1Ab基因的阳性杂交带。以pUCP1 9为载体 ,克隆了该片段并证明其含有cry1Ab基因。对  (本文共5页) 阅读全文>>

吉林农业大学
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抗虫基因cry1Ab13植物表达载体的构建及转化玉米的研究

玉米(Zea mays L.)是世界上重要的经济作物,同时也是我国第一大粮食作物,在社会生产的很多领域都有应用。转基因技术在玉米育种中的应用有效提高了玉米的育种效率,在玉米抗病、抗虫、抗逆、高产及品质改良等方面发挥着重要作用,其中以抗虫转基因玉米的发展最为快速、应用最为广泛。我国玉米的生产一直受到虫害的严重影响,其中鳞翅目害虫亚洲玉米螟(A CB,O.furnacalis)对我国玉米生产的影响最为显著,每年因玉米螟虫害致使玉米减产10%~30%。通过基因工程育种将抗虫基因转入玉米,能够显著提高玉米对玉米螟的抗性。本实验从克隆表达载体pUC57-cry1Ab13上扩增得到cry1Ab13基因片段,通过同源重组方法与植物表达载体pCAMBIA3300-Bar连接,获得以抗除草剂Bar基因为筛选标记的重组植物表达载体pCAMBIA3300-cry1Ab13-Bar,并利用农杆菌介导法将其转入玉米自交系H99,对转基因植株中cry1Ab...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

《华南农业大学学报》2016年05期
华南农业大学学报

转cry1Ab13基因玉米新种质的创制

【目的】构建包含抗鳞翅目害虫基因cry1Ab13的重组植物表达载体,并利用其创制对玉米螟Ostrinia furnacalis具有优良抗性的转基因玉米Zea may L.新种质。【方法】利用同源重组法将cry1Ab13基因连接到表达载体pCAMBIA3300-Bar上,获得以抗除草剂Bar基因为筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3300-cry1Ab13-Bar。通过农杆菌介导法转化玉米自交系H99...  (本文共7页) 阅读全文>>

吉林农业大学
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抗虫基因cry1Ab13在大豆中的遗传转化及抗虫性鉴定

大豆是我国食用油主要的来源,同时也是重要的植物蛋白资源,具有极大的开发潜力。大豆虫害是影响大豆产量和质量的一个重要因素,通过利用转基因技术,使抗虫基因在植物中表达,是综合防治害虫的重要方式之一。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是对鳞翅目等多种害虫具有高毒杀作用的微生物。它能在芽孢形成的同时,形成特异性杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal proteins,简称ICP)。当昆虫取食ICP后,活化的ICP与昆虫肠道内特有的特异性结合蛋白结合,结合以后,ICP全部或部分融合于细胞膜中,使细胞产生一些孔洞或离子通道,导致细胞内渗透压被破坏,而细胞破裂。随着以上过程的发生,昆虫将不再食,最后死亡。因此Bt在植物抗虫育种中得以广泛的应用。到目前为止cry1Ab基因共有42种,其ICP的氨基酸序列同源性在75%到95%之间。本试验所用的cry1Ab13基因是cry1Ab基因的1种,但是在该...  (本文共45页) 本文目录 | 阅读全文>>

《大豆科学》2016年04期
大豆科学

抗虫基因cry1Ab13在大豆中的遗传转化及抗虫性鉴定

cry1Ab13基因是抗虫基因,编码的杀虫晶体蛋白对鳞翅目害虫具有一定的毒杀作用,构建了植物表达载体pCambia3300-35S-cry1Ab13,通过花粉管通道法将该载体转入大豆品种吉农28中,经PCR扩增检测得到15株T_1代阳性植株。Southern blot...  (本文共7页) 阅读全文>>