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人IL-18cDNA克隆及原核表达

目的 从外周血单核细胞中克隆人IL 1 8成熟编码序列cDNA ,对其进行测序并构建原核表达载体 ,进行原核表达。方法 从人外周血单核细胞中分离总RNA ,进行RT PCR获得人IL 1 8cDNA。测序证实其结果正确后 ,构建原核表达载体。E .coli的表达产物  (本文共3页) 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

鸡IL-18cDNA基因的克隆表达及其对柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的免疫增强作用

鸡球虫病是鸡球虫寄生在细胞内的原虫疾病,给养禽业所带来的经济损失较为严重。实践证明,早期临床抗球虫药控制和活虫苗的应用,在养禽业球虫的防治上具有重要作用。但大量耐药株以及活苗使用的不方便和低保护率,促使科学家不断地追求抗球虫的新方法。非药物性防治不断引起了人们的兴趣,重组抗球虫基因工程疫苗的研究亦获得了较快的发展。细胞因子在调节机体免疫方面具有重要作用,不同的细胞因子类型诱导调节不同的免疫应答类型。IL-18的细胞来源种类较多,它可诱导Th1型细胞因子以及某些趋化因子受体的表达,如IFN-γ、GM-CSF、TNF-a、IL-1等。在特定的组织环境中,IL-18亦可诱导Th2型细胞因子的分泌,如IL-13、IL-4等。以LPS激活14日龄罗曼氏雏鸡脾细胞,提取总mRNA,以RT-PCR法扩增编码鸡成熟IL-18蛋白的cDNA,目的基因重组于原核表达载体pBAD/myc-his B,并在大肠杆菌Top10中表达,用SDS-PAGE检...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>