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通过载体DHFR基因的弱化提高抗体在CHO细胞中的表达

目的:提高抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体在二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞株(CHO/DHFR-)中表达的产量。方法:对表达载体中DHFR基因表达调控序列进行一系列的删除突变和点突变后,构建不同的嵌合抗体表达载体。用这些载体转染CHO细胞并以递增量的氨甲喋呤(MTX)筛选,用ELISA法测定每个加压水平的各组细胞中抗体的表  (本文共4页) 阅读全文>>

第四军医大学
第四军医大学

全人抗体高效真核表达载体的构建与表面重塑抗体rCAb1

本实验以HAb18G/CD147- HAb18抗原抗体系统为基础,构建并筛选了用于全人抗体表达的高效真核载体;之后,克隆了抗人大肠癌抗体CAb1轻、重链可变区基因VH和VL,通过制备复性的嵌合cFab对获得的基因的可靠性和准确性进行验证;进而以获得的CAb1的VH和VL为基础,对其进行人源化表面重塑抗体rCAb1设计;最终,选用鉴定的抗体真核表达载体,实现了重组rCAb1在哺乳动物细胞中的表达。第一部分研究内容:高效全人抗体真核表达载体的构建及筛选目的:获得具有自主产权,且能表达全人抗体的高效真核表达载体方法:按照标准DNA重组操作,构建以下不同的真核表达载体:包括弱化多顺反子pIRES1-18L;pIRES2-18H;定点重组载体18-pDHL-FRT;双载体系统18H-pDHA,18L-pCI;反向双载体系统18H-PCI,18L-p105;多顺反子表达载体18H-L-pCI-FRT;弱化筛选标记载体18H-L-pCII;以...  (本文共161页) 本文目录 | 阅读全文>>

《科技风》2020年23期
科技风

CHO细胞生产蛋白糖基化影响的研究

蛋白质的糖基化对于其作为生物治疗剂至关重要,已经展开了许多对中国仓鼠卵...  (本文共1页) 阅读全文>>

《科技风》2020年21期
科技风

CHO细胞无血清培养基的研究进展

由于血清会增加支原体、病毒和朊病毒污染,使纯化过程复杂化,因此中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞的悬...  (本文共1页) 阅读全文>>

《食品与生物技术学报》2017年05期
食品与生物技术学报

人血清白蛋白-白介素-2融合蛋白在CHO细胞中的表达

白细胞介素-2在人体免疫应答中具有重要作用,常用于治疗肿瘤、肝炎和免疫缺陷性疾病等多种疾病,但因其体内半衰期短而限制了其临床应用。文中构建了含有融合蛋白基因HSA-IL-2的p MH3质粒,并通过电转染的方法转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO细胞)中,利用p MH3...  (本文共5页) 阅读全文>>

《化工管理》2017年27期
化工管理

Plackett-Burman和响应面法优化CHO细胞无血清培养基中关键营养成分

为了提高CHO细胞在无血清培养基中的生长和蛋白表达能力。通过文献选择16种物质,利用Plackett-Burman实验法筛选有出显著影响的4...  (本文共2页) 阅读全文>>

《湖北医药学院学报》2017年04期
湖北医药学院学报

接种重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)出现疑似异常反应1例报道

重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),英文名称(Recombinant Hepatitis B.Vaccine),是通过重组CHO...  (本文共2页) 阅读全文>>