分享到:

卵母细胞的激活

哺乳动物卵母细胞人工激活的方法、机理及激活时间进行总结   (本文共3页) 阅读全文>>

山东农业大学
山东农业大学

注射圆形精子细胞的山羊卵母细胞激活和胚胎发育的研究

卵母细胞胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)作为治疗严重少弱精子症病人的有效方法,现在已经被广泛应用于临床,并出生了大量ICSI受精试管婴儿。在临床上,仍有部分非梗阻性无精子症病人无法产生正常的成熟精子,但可以从其精液或睾丸活检标本中回收到圆形精子细胞(round spermatid,ROS)。已经证明,ROS作为最早的单倍体雄性生殖细胞将其显微注射到卵母细胞后可以形成雄原核并参与配子配合。因此,圆形精子细胞注射(Round Spermatid Injection,ROSI)在临床上作为治疗男性不育的一种新手段,为那些因为不能产生成熟精子而不育的男性提供了生育自己遗传学子女的机会。目前,虽然已经出生了ROSI试管婴儿,但是ROSI仍然存在受精率低,后代出生率低等问题。主要原因可能在于ROSI后卵母细胞不能激活;ROS携带的中心体功能不完善或异常,不能在卵母细胞内充当微管组...  (本文共93页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

牛卵母细胞孤雌激活与体细胞核移植

1.本研究比较了不同类型血清、不同来源的激素以及大卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响。在无大卵泡液存在时,成熟培养液中添加发情牛血清(OCS)和胎牛血清(FBS),卵母细胞的体外成熟率显著高于添加新生牛血清(NCS)时的成熟率(83.1%,82.9%比53.0%,P<0.01);在培养液中添加3%大滤泡液(BFF)时,OCS和FBS内卵母细胞的成熟率明显高于NCS内的成熟率(85.1%,83.5%比57.7%,P<0.01)。结果表明:本实验条件下,OCS和FBS可以显著提高卵母细胞的成熟率,而NCS不适合于牛卵母细胞的体外成熟;BFF添加与否不影响卵母细胞的成熟率。在培养液中添加低纯度的FSH(10μg/ml)和LH(20μg/ml)或高纯度的HMG(含0.075U/ml FSH+0.075U/ml LH)对牛卵母细胞体外成熟无显著的差异。2.比较了几种不同的化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响,为体细胞核移植胚胎的激活确立激活条...  (本文共143页) 本文目录 | 阅读全文>>

西南农业大学
西南农业大学

电场导入1,4,5-三磷酸肌醇(IP_3)激活小鼠卵母细胞的研究

研究哺乳动物卵母细胞的激活及其孤雌胚的发育,有利于探索卵母细胞的生理反应,分析理化激活与精子激活的特征,对阐明哺乳动物卵母细胞的激活、受精和发育机理,解答这些重要的生命现象及技术的应用具有重要意义。同时也可为核移植的研究提供技术参考。IP_3是影响细胞激活的关键因子。本实验利用电激活过程中卵母细胞膜上形成的瞬间孔洞,向卵子内导入一定量的IP_3,通过IP_3第二信使途径,打开胞内钙库,模仿自然受精过程中卵母细胞内Ca~(2+)的波动性变化,研究电场导入IP_3对小鼠卵子的激活作用。该法排除了胞质注射IP_3时人为因素的干扰,并克服了一次性注射的不科学性,保证了结果的可靠性。实验以宁波新科CRY-3细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0.5mm)作为主要实验仪器。首先对影响电激活的诸多因素,如:直流脉冲的强度(1.0kv/cm、1.5kv/cm、2.0kv/cm、2.5kv/cm)、脉冲宽度(40μs、80μs、100μs...  (本文共55页) 本文目录 | 阅读全文>>

石河子大学
石河子大学

绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)对绵羊卵母细胞的激活作用及早期胚胎发育的影响

目的:在我国绵羊的用途较多是肉毛兼用的家畜,因此在屠宰过程中会产生大量的卵巢组织。然而在现实生产中绵羊卵巢组织的利用率并不高,利用绵羊卵巢组织生产优质胚胎的技术研究发展缓慢,因而提高卵巢组织的重复利用率生产优质胚胎的技术是进一步要解决的问题。用卵巢组织生产优质胚胎可能主要是受卵母细胞激活效率的影响,当前主要是使用蛋白激酶抑制剂或其他人工激活方法激活卵母细胞。但这种激活方式不能使我们清楚地了解卵母细胞激活的机理,可能会对我们研究卵母细胞的激活机理产生误区,使我们不能确定对后期胚胎的发育是否会产生不利影响。因而,我们需要一种新的生物激活制剂来激活卵母细胞。经研究发现精子中存在一种特异性的激活因子,即磷脂酶C zeta(PLCζ)。研究证实它是通过增加卵母细胞胞质内Ca2+浓度来激活卵母细胞,并且能使早期胚胎正常发育。它的发现将会利于我们更进一步研究卵母细胞的激活机制和早期胚胎的发育,同时大量生产优质胚胎的技术也将会快速发展。在本试验...  (本文共46页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

小鼠卵母细胞孤雌激活、去核方法及受精卵体外培养研究

小鼠卵母细胞相对较小,显微操作易导致胞质散裂,因此小鼠核移植难度较大,成功率较低,其中培养液、激活条件、去核方法都极大地影响其成功率。本研究通过对小鼠受精卵体外培养体系,MII期卵母细胞孤雌激活条件的筛选以及探讨MII期卵母细胞的去核方法为小鼠体细胞核移植的成功奠定基础。1、筛选最佳的小鼠胚胎体外发育培养体系,并进一步探讨不同浓度的FBS、PVA、hLIF对其体外发育的影响,从而为小鼠卵母细胞核移植后重构胚的体外培养提供支持。试验I:分别用自配的M16、mM16、KSOM、mKSOM、CZB进行体外发育培养,进而筛选出一种最佳的体外培养体系;在筛选出培养液的基础上进行试验II、III、IV,分别探讨FBS、PVA、hLIF对小鼠胚胎发育的影响。结果,试验I中,受精卵培养效果最好的培养液为mM16,其次为mKSOM,在这两种培养液中,胚胎发育到4-细胞的比率分别为94.7%(91/96)和85.8.%(73/85),发育到桑椹胚/...  (本文共65页) 本文目录 | 阅读全文>>