分享到:

细胞毒素Gelonin的亚克隆、表达与纯化

将分别含有细胞毒素gelonin基因片断的重组子pUC-gell和pUC-gel Ⅱ,按照预先设计的酶切位点,通过亚克隆得到含有gelonin全基因的重组子pUC-gel。然后将pUC-gel与pET28a同时用NdeI/  (本文共5页) 阅读全文>>

山西大学
山西大学

截短型细胞毒素Gelonin的分子构象和抗肿瘤活性

Gelonin是来源于大戟科植物Gelonium.multiflorum种子中的一种细胞毒蛋白,由251个氨基酸残基组成,分子量约为28000。Gelonin属于单链核糖体失活蛋白,具有RNA特异性的N-糖苷酶活性,可专一性地水解真核细胞核糖体60S亚基28S rRNA第4324位腺嘌呤的N-C糖苷键,释放一个腺嘌呤(A)碱基使核糖体失活,从而抑制蛋白质的生物合成,导致细胞死亡。此外,Gelonin也具有类DNase活性和糖基化酶活性,可降细胞核DNA。由于Gelonin缺少双链核糖体失活蛋白的B链,因此,它对完整真核细胞的毒性比较低,常被作为免疫毒素的毒蛋白,用于研究或治疗自身免疫性疾病或恶性肿瘤。根据已知Gelonin的氨基酸序列,逆向推算出整个基因的碱基序列,根据E.coli的密码子偏爱性和后续基因克隆的需要,通过沉默突变设计相应的酶切位点和碱基序列,将整个基因分为四段,每个片段约175~220bp,每一个片段中的互补链从...  (本文共53页) 本文目录 | 阅读全文>>

《高技术通讯》2002年01期
高技术通讯

重组植物毒素gelonin的纯化及性质研究

采用 pET2 8a载体系统在E .coliBL2 1中进行了植物毒素gelonin的原核表达 ,产物经SP Sepharose ,Superdex 75二步纯化 ,获得了电泳纯的...  (本文共4页) 阅读全文>>

《四川大学学报(医学版)》2011年05期
四川大学学报(医学版)

抗EGFR单链抗体融合gelonin毒素的原核表达载体的构建及其生物活性研究

目的构建表达抗表皮生长因子受体(EGFR)单链抗体融合gelonin毒素的原核表达载体,并初步验证其功能。方法以抗EGFR单链抗体基因为模板,通过PCR及酶切连接将该基因定向克隆入含gelonin毒素的原核表达载体pET32a中,将该质粒转入BL21(DE3)中经异丙基疏代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到包涵体,通过变性、复性并进行阳离子交换层析得到较纯的目的蛋白(重组免疫毒素rEG蛋...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国生物化学与分子生物学报》2006年05期
中国生物化学与分子生物学报

截短型细胞毒素Gelonin的分子构象和生物活性

为了探索免疫络合物中具杀伤靶细胞的毒素,gelonin的结构与功能的关系,根据化学合成的gelonin基因序列和3维分子构象设计了N端区Gly,Leu,Asp和或C端区Asp,Lys,Asp,Pro,Lys缺失的gelonin.以重组质粒pEgel为模板,在相应引物存在下,...  (本文共6页) 阅读全文>>

《肿瘤研究与临床》2006年02期
肿瘤研究与临床

细胞毒素Gelonin的结构功能及其在抗癌治疗中的应用前景

核糖体失活蛋白(RIPs)是一类存在于某些高等植物体内的天然抗癌活性成分,分为Ⅰ型即单链RIPs和Ⅱ型即双链RIPs...  (本文共3页) 阅读全文>>