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提高腺病毒载体的感染效率的研究进展

人类腺病毒(adenovirus,Ad)常作为肿瘤治疗的溶瘤细胞介质或抑瘤基因递送载体,其中最为常用的就是腺病毒5型(Ad5)。  (本文共2页) 阅读全文>>

第三军医大学
第三军医大学

5和5/F35型腺病毒载体对人骨髓间充质干细胞感染效率的比较

【目的】:探讨5和5/F35型腺病毒载体对体外培养的人骨髓间充质干细胞(Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, hBMSCs)的感染效率。【方法】:实验于2008-03/2008-10在解放军北京军区总医院血液科实验室完成。先用淋巴细胞分离液分离健康供者的骨髓单个核细胞,然后采用密度梯度离心和贴壁筛选的方法体外分离培养hBMSCs,传至第3代后用流式细胞仪检测hBMSCs表型;按1×104密度接种于24孔板,细胞贴壁后分别换用成骨、成脂诱导液培养,以碱性磷酸酶、油红O染色检测其分化特性。用不同滴度编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad5 EGFP和Ad5/F35 EGFP)感染体外培养的hBMSCs和人白血病细胞系(K562,U937和HL60),荧光显微镜观察、流式细胞仪检测EGFP阳性表达率,并用台盼蓝拒染法检测不同病毒滴度感染后hBMSCs活细胞比例。【结果】:...  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

郑州大学
郑州大学

表达His-tag-ICP47融合基因腺病毒载体的构建及其免疫活性的研究

研究背景:器官移植是治疗终末期器官疾病的重要方法之一,但供源缺乏和排斥反应是困扰器官移植的两大难题。肝细胞移植(hepatocyte transplantation, HT)最大的优点是可以一肝多用,使更多的人得到移植机会,降低等待肝源时的死亡率,因此有可能取代原位肝移植(orthotopic liver tranplantation, OLT)用于终末期肝脏疾病患者,但免疫排斥仍是HT需要解决的一个重要问题。随着现代基因工程的发展,具有免疫逃逸功能的转基因肝细胞成为HT的研究热点。腺病毒载体能够将外源基因安全而高效地转染入多种细胞,因此被广泛地应用于基因治疗的各个领域,但宿主对基因表达产物的排斥反应严重地限制了基因治疗的发展,临床现有的免疫抑制剂并不总是有效,而且毒副作用大。因此,降低或消除机体对外源基因表达产物及其转染细胞的免疫反应,成为长期基因治疗中的研究热点。主要组织相容性复合体(major histocompatibi...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

《生命的化学》2010年01期
生命的化学

腺病毒载体衣壳蛋白质的遗传修饰

腺病毒载体是最早用于基因治疗研究的病毒载体之一,也是目前肿瘤基因治疗中最为常见的病毒载体之一,其主要通过靶细胞表面的天然柯萨奇腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)感染宿主细胞。由于大多数肿瘤...  (本文共6页) 阅读全文>>

河北大学
河北大学

造血调控因子的载体构建及感染效率优化

造血干细胞(Hematopoietic Stem Cells,HSCs)是一种能够自我更新和分化为所有血系细胞的成体干细胞,虽然在体内数目稀少,但在造血发生和免疫系统中有着重要的作用。目前,造血干细胞移植是治疗和治愈恶性血液病、重型再生障碍性贫血、一些实体瘤等疾病最有效的方法。然而,造血干细胞来源有限、数量不足和扩增困难等缺陷,是造血干细胞移植治疗血液疾病的难关。近年来,通过大量基因敲除小鼠模型和白血病人的血液分析鉴定出许多与造血系统密切相关的转录因子,这些转录因子在造血干细胞自我更新和成熟分化中发挥重要作用。人们思考能否通过这些转录因子将病人的其它细胞转分化为造血干细胞。已有文章表明转录因子可以将小鼠的内皮细胞转分化为造血干细胞。也有文章报道可以把人的诱导多潜能干细胞(induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)分化为生血内皮,再通过转录因子诱导分化为造血干细胞。对人而言,内皮细胞是一种难以获得的...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

《厦门大学学报(自然科学版)》2005年06期
厦门大学学报(自然科学版)

重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞株的感染效率及EGFP表达水平研究

研究重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞的感染效率及表达水平,可为痘苗病毒表达系统宿主细胞的正确选择提供依据.本研究利用重组绿色荧光蛋白基因的痘苗病毒WR-EGFP同时感染不同的哺乳动物细胞株,利用流式细胞仪检测EGFP的表达...  (本文共4页) 阅读全文>>

《临床口腔医学杂志》2013年01期
临床口腔医学杂志

慢病毒载体感染人口腔黏膜成纤维细胞稳定表达绿色荧光蛋白的研究

目的:确立慢病毒载体高效感染人口腔黏膜成纤维细胞的感染条件,为进一步应用基因工程技术研究人口腔黏膜成纤维细胞奠定基础。方法:采用组织块法培养原代人口腔黏膜成纤维细胞,免疫组化SP法鉴定细胞类型,将携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体以不同感染复数(multipli...  (本文共3页) 阅读全文>>