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流感病毒ns1基因的克隆及其原核表达载体的构建

为了解H5N1亚型流感病毒株的ns1基因特性及其规模制备NS1蛋白,首先将病毒在鸡胚中传代,从收获的尿囊液中提取RNA,采用RT-PCR技术扩增流感病毒全长ns基因。测序显示H5N1亚型流感病毒NS1cDNA全长678bp,编码225个氨基酸。BLAST分析表明,Qa/ST/852/01(H5N1)病毒株ns1基因与近年来从华南地区分离的禽H5N1毒株的ns1基因有  (本文共5页) 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

禽流感病毒(H9N2亚型)NS基因的克隆及表达载体的构建

禽流感(Avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽传染病,于1878年首次在意大利暴发流行。禽流感主要表现为,高致病力毒株致鸡只的大量死亡,非高致病力毒株引起产蛋量下降,免疫功能障碍而继发细菌或病毒的感染。自1994年首次报道禽流感在中国流行以来,禽流感H9N2亚型已成为中国当前的主型。禽流感病毒H9N2亚型引起的禽流感的报道最早见于1966年,感染火鸡主要表现为轻度的上呼吸道症状。但自90年代开始,H9N2禽流感病毒对鸡的危害越来越严重,除引起上呼吸道障碍、产蛋量严重下降外,个别毒株还引起了较大的死亡。因此,开展对禽流感病毒H9N2亚型毒力的研究,无论在病毒学,还是在兽医学等学科上均具有重要的学术意义。本实验用接种鸡胚的病毒增殖方法获得了A/Chicken/Mudanjiang/0823/00(H9N2)分离株的大量增殖,增殖病毒经差速离心进行纯化,经超迷离心浓缩。根据Genbank发表的AIV NS基...  (本文共48页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国兽医科学》2016年02期
中国兽医科学

水貂阿留申病病毒NS1蛋白B细胞抗原表位的分析与鉴定

为了鉴定水貂阿留申病病毒(AMDV)NS1蛋白的抗原表位,利用生物信息学软件对NS1蛋白的理化性质、二级结构、三级结构及抗原性进行综合分析,预测结果显示,35~56aa、134~143aa、273~288aa、302~321aa、387~395aa、499~509aa存在抗原表位的可能性较大。...  (本文共7页) 阅读全文>>

《免疫学杂志》2016年08期
免疫学杂志

西尼罗病毒NS1单克隆抗体的制备及鉴定

目的以西尼罗病毒非结构蛋白(nonstructural protein1,NS1)为免疫原制备西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法在表达具有良好抗原性的重组西尼罗病毒NS1蛋白基础上免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国兽医科学》2007年07期
中国兽医科学

猪日本乙型脑炎病毒NS1基因重组腺病毒的构建及表达

应用RT-PCR方法扩增出猪日本乙型脑炎病毒(JEV)的NS1基因,通过SalⅠ+EcoRⅠ双酶切后把该基因插入到经过同样双酶切的穿梭质粒pDC31...  (本文共4页) 阅读全文>>

蚌埠医学院
蚌埠医学院

CD44剪接变异体在胃癌中的表达及细小病毒H-1非结构蛋白NS1对胃癌细胞株CD44剪接变异体表达的影响

背景:胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤,2012年我国胃癌发病率、死亡率分别为31.28/10万、22.04/10万,但胃癌5年生存率却不足30%。CD44与胃癌的发展有着密切的联系,而具有抑瘤作用的细小病毒H-1非结构蛋白1(non-structural protein,NS1)可抑制胃癌细胞的增殖。CD44作为肿瘤干细胞的表面标记物,CD44剪接变异体(CD44 transcript variant,CD44v)参与了肿瘤发生发展的全部过程,如它的形成、转移、复发。目的:观察胃癌组织及转染NS1前后胃癌细胞CD44v的表达情况,分析CD44v的表达水平与胃癌临床病理特征的关系,以及研究NS1对胃癌细胞株CD44v表达的影响。方法:1.收集东部战区总医院2018年6月-11月经胃癌根治术治疗的胃癌标本21例及健康胃组织7例,利用qRT-PCR检测胃癌组织CD44v的表达情况。2.利用脂质体法将pEGFP-N1-Flag-NS1重组...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

南方医科大学
南方医科大学

西尼罗病毒非结构蛋白NS1特异性单克隆抗体的制备及应用

当今,新发病毒性传染病不断出现,我国南方如广东、广西、海南等地由于地处热带亚热带地区,全年平均气温高,气候湿热,特别适合于各种虫媒性病原体的繁殖,成为急性虫媒病毒性传染性疾病的自然疫源区和发生地。西尼罗病毒(West Nile Virus, WNV)属黄病毒科黄病毒属中乙型脑炎病毒的血清群[1,21,主要在蚊-鸟-蚊的循环中进行繁殖,并通过蚊虫特别是库蚊传播给人类,引发西尼罗热和西尼罗脑炎。西尼罗热于1937年首次暴发于乌干达[3],随后迅速传播到非洲、欧洲、美国、加拿大各地,已成为一种严重危害人类健康的蚊媒传播性病毒性传染病[4]。自1999年,该病毒首次登陆西半球,并迅速肆虐美国,截止2016年1月份,已经有41679例美国居民确诊为西尼罗病毒感染,其中,死亡病例高达1753例(http://www.cdc.gov/ncidod/dvbid/westnile/index.htm),是继炭疽事件之后又一种导致全美恐慌的致病性微...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>