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长期混合淋巴细胞培养-细胞毒实验模型的建立

目的 建立一种能较逼真地模拟移植排斥反应的体外实验模型。方法 利用EB病毒转化的B淋巴母样细胞系作为刺激细胞 ,诱导同种异体或异种外周血单个核细胞增殖 ,并分化为效应细胞 ,然后检测效应细胞对刺激细胞源靶细胞  (本文共3页) 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

细胞因子激活的供体NK细胞和供体γδT细胞在异基因造血干细胞移植中的作用与机制研究

第一部分细胞因子激活的记忆样供体NK细胞在异基因造血干细胞移植后移植物抗白血病中的作用与机制目的:体外实验筛选诱导记忆样NK细胞的细胞因子组合,并验证细胞因子刺激的NK细胞的记忆样细胞表型;体内实验检测细胞因子激活的记忆样供体NK细胞在异基因造血干细胞移植后发挥的移植物抗白血病作用及机制。方法:在体外实验中,培养小鼠骨髓来源的NK细胞,体外加细胞因子IL-12、IL-15、IL-18单独或两两联合或三者联合刺激NK细胞16小时,并以IL-2刺激的NK细胞作为对照,流式胞膜染色检测细胞因子体外刺激的NK细胞纯度、活化成熟表型,胞内染色检测细胞因子的分泌情况,细胞毒实验及流式染色检测NK细胞对肿瘤细胞体外杀伤水平,并通过体外细胞因子的再次刺激实验检测记忆样NK细胞的记忆能力。以BALB/c(H2Kd)小鼠为受体鼠,经清髓辐照后,过继输注C57BL/6(H2Kb)小鼠的骨髓细胞建立异基因造血干细胞移植模型,于移植当天,过继输注小鼠B细...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>

蚌埠医学院
蚌埠医学院

体外刺激扩增培养的γδT细胞杀伤肝癌细胞的研究

目的:体外刺激扩增培养的γδT细胞杀伤肝癌细胞效果及机制探讨和体内验证。方法:1.肝素抗凝静脉血经密度梯度离心法分离获取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)之后,在体外分五组进行刺激扩增,实验对照组分两组,一组只加白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2),另一组加植物血凝素(phytohaemagglutinin,PHA),实验组加磷酸化抗原1-羟基-2-甲基-2-丁烯-4-基-4-二磷酸(1-Hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl 4-diphosphate,HDMAPP)、唑来膦酸(zoledronic acid,ZOL)和结核分枝杆菌耐热抗原(mycobacterium tuberculosis heat resistant antigen,Mtb-HAg),其中PHA主要刺激活化αβT细胞,HDMAPP、ZOL、Mtb-HA...  (本文共61页) 本文目录 | 阅读全文>>

《军事医学》2017年09期
军事医学

NK细胞对人肝癌细胞的杀伤作用及其可能机制

目的以天然杀伤细胞(NK)-92细胞系为模型,研究NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用,并探讨其可能的作用机制。方法建立NK-92细胞系的体外培养方法,利用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和乳酸脱氢酶细胞毒性检测实验(lactate dehydrogenase cytotoxicity assay)等体外实验验证NK-92细胞对多种肝癌细胞的体外杀伤作用。同时建立人肝癌细胞株HepG2的裸鼠皮下荷瘤模型,每只裸鼠分别在荷瘤后第2、9、16、23天共4次通过尾静脉注射1×10~7个NK-92细胞,对照组注射等体积PBS,密切观察实验组和对照组裸鼠移植瘤大小、体积、质量以及裸鼠存活状态。...  (本文共9页) 阅读全文>>

郑州大学
郑州大学

刺芒氨基二硫代甲酸酯衍生物1121的合成及对PC3细胞的活性研究

文献报道,异黄酮在自然界广泛存在并且有较好的抗肿瘤药理活性,很多含有氨基二硫代甲酸酯结构片段的化合物也具有较高的抗肿瘤活性。课题组前期基于分子拼合原理设计合成了一系列异黄酮的氨基二硫代甲酸酯类衍生物,并检测了它们在不同肿瘤细胞株中的抑制活性。结果显示编号为1121的化合物活性最佳,并对前列腺癌细胞PC3具有明显的抗增殖活性。因此我们主要选择化合物1121深入研究其对前列腺癌细胞的作用机制。主要研究结果如下:1.MTT结果显示在胃癌细胞株(MGC803)、食管癌细胞株(EC109)和前列腺癌细胞株(PC3)中,1121对PC3细胞显示出抗增殖作用。其中1121在PC3细胞株的IC_(50)值为1.04±0.047,优于阳性对照药5-FU。2.为了检测化合物1121是否引起PC3细胞死亡并且确定细胞死亡类型,我们用流式细胞术检测化合物1121处理PC3细胞之后的Annexin V-FITC和PI染色比例。结果显示1121并不引起PC...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

人巨细胞病毒感染恶性神经胶质瘤细胞对肿瘤干性的影响

胶质瘤是临床上最常见的原发性脑瘤,多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)是最具侵袭性的致命性脑肿瘤。转录激活因子5(activating transcription factor 5,ATF5)是抗凋亡蛋白的一种,在恶性胶质瘤中高表达。人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)为疱疹病毒β亚科的病毒,目前的一些研究证实HCMV在胶质瘤中存在,且几种HCMV病毒蛋白在胶质瘤细胞中具有致癌性。本课题小组的前期实验已检测了HCMV感染对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响。为进一步探讨HCMV感染与胶质瘤细胞干性转化之间的关联,本实验构建了体外培养的HCMV感染神经胶质瘤U251细胞模型和HCMV感染原代神经神经胶质瘤细胞模型。以免疫荧光染色实验(Immunofluorescence,IF)检测HCMV感染胶质瘤细胞不同时间点HCMV即刻早期蛋白(HCMV IE2)、ATF5及肿瘤...  (本文共57页) 本文目录 | 阅读全文>>