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酵母双杂交技术在病原生物蛋白质研究中的应用

酵母双杂交技术在蛋白质的研究中有着重要的、不可替代的位置。在基因组蛋白质连锁图的建立、药物及其  (本文共5页) 阅读全文>>

《生物技术进展》2015年05期
生物技术进展

酵母双杂交技术应用进展

酵母双杂交技术是鉴定蛋白互作最有效和最广泛的分子生物学技术。该技术能直接作用于活细胞,检测细胞内蛋白质互作,具有成本低、易操作、可达到全基因组水平、能进行品种间的互作鉴定等...  (本文共5页) 阅读全文>>

《遗传》2006年12期
遗传

大规模酵母双杂交技术研究蛋白质相互作用的应用

简介了酵母双杂交技术原理,总结了酵母双杂交技术大规模筛选蛋白质相互作用的基础、应用及存在的问题。因为大规...  (本文共6页) 阅读全文>>

权威出处: 《遗传》2006年12期
甘肃农业大学
甘肃农业大学

利用酵母双杂交技术筛选与马铃薯StSOD1互作的调控蛋白

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)在需氧原核生物和真核生物中广泛存在,在活性氧清除系统中发挥着非常重要的作用。它能够将超氧化物阴离子(O_2·~-)快速歧化为过氧化氢(H_2O_2)和分子氧,在随后的反应中,H_2O_2被过氧化氢酶、各种过氧化物酶和抗坏血酸-谷胱甘肽循环系统的作用转化为水和分子氧。SOD对于清除氧自由基,防止自由基破坏细胞组织结构和功能完整性,保护细胞免受氧化应激损伤有着非常重要的作用。研究表明,马铃薯块茎在打破休眠时会产生大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS),这些过量的活性氧会严重抑制马铃薯萌发后的生长状态,因此,研究调控SOD表达的机制非常重要。由于SOD是一种功能蛋白,调节其表达的上游调节因子、调节机制和信号转导途径还很不清楚。因此,本研究利用酵母双杂交技术来筛选调节SOD1基因表达的上游调节因子,进而更好的研究调节SOD表达的机制和信号转...  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

OsMKK1和OsMKK6互作蛋白的筛选与鉴定

植物MAPK级联途径广泛参与调控植物的细胞分化、激素应答、胁迫响应和生长发育等过程。OsMKKs是该途径中游的一类促分裂原蛋白激酶激酶,在信号转导过程中通过汇聚上游刺激信号并将其传递给下游靶蛋白,从而使植物适应外界逆境。研究表明,OsMKKs蛋白家族分为A、B、C和D四个亚族,其中OsMKK1和OsMKK6属于A亚族。而且,OsMKK1参与响应盐胁迫的信号传导过程,OsMKK6参与响应低温胁迫的信号传导过程。为进一步研究OsMKK1和OsMKK6在水稻MAPK信号传导途径中的作用机制,本研究从酵母双杂交水稻低温cDNA文库中大规模筛选与OsMKK1和OsMKK6上/下游互作的蛋白;并利用CRISPR/Cas9技术和qRT-PCR创建并鉴定了OsMKK1和OsMKK6突变体株系。主要结果如下:为筛选出与OsMKK1或OsMKK6互作的蛋白,构建了pGBKT7-MKK1和pGBKT7-MKK6两个诱饵载体,并检测了它们的自激活特性,...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北林业大学
东北林业大学

利用酵母双杂交技术筛选拟南芥AtSnRK2.4的互作蛋白

SnRK2(sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 2)是一类植物中特有的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶,参与植物体内多种信号转导,在应答无机环境(盐、干旱等)胁迫以及一些基本的生理过程中起到非常重要的作用。本研究以拟南芥SnRK2成员AtSnRK2.4为研究对象,我们以AtSnRK2.4为“诱饵”蛋白通过酵母双杂交技术筛选与其有相互作用的蛋白,确定AtSnRK2.4与互作蛋白之间的相互作用关系,为探求其抗逆机理奠定基础。本研究中,构建了pGBKT7-AtSnRK2.表达载体。通过酵母双杂交技术筛选出AtSnRK2.4的互作蛋白为2-10。然后,利用体外Pull-down实验和体内的双分子荧光互补(BiFC)试验进一步证实了两个蛋白之间的相互作用关系。AtSnRK2.4蛋白具有自磷酸化作用。并且利用GFP荧光标记技术,检测到AtSnRK2.4和2-10蛋白定位在洋葱表皮细胞的胞质...  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>