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Wilson病ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体构建及功能研究

【目的】构建ATP7B基因铜离子结合区缺失突变体,研究其在Tx小鼠肝细胞中的表达及功能。【方法】利用长片断PCR和质粒重组技术构建不同铜离子结合区的缺失体,脂质体介导转染Tx小鼠肝脏细胞,然后进行高铜、低铜孵育,观察ATP7  (本文共5页) 阅读全文>>

《植物生理学报》2011年09期
植物生理学报

抗坏血酸对植物生长发育的作用及其缺失突变体的研究进展

抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)是植物组织内广泛存在的高丰度小分子物质。近年的研究表明它可能通过复杂的...  (本文共8页) 阅读全文>>

南京农业大学
南京农业大学

赤霉素对细胞壁组分以及拟南芥主根伸长的影响

赤霉素是一种二萜类的植物激素,它在很多生长发育进程中起着重要的调控作用,如种子萌发、茎的伸长、叶片伸展和种子发育。近年来,赤霉素更多的生理功能被发掘出来,如参与生物胁迫和非生物胁迫。鉴于赤霉素在植物生长发育中的重要地位,本研究试图发掘赤霉素更多的生理功能。细胞壁是细胞抵抗外界不良条件的天然屏障,也是限制细胞生长的壁垒。赤霉素能促进细胞的伸长,也能控制分生组织的大小。赤霉素作为细胞伸长的调节因子,细胞壁作为限制伸长的结构基础,这二者在植物长生长中是否有直接的相互作用?本研究以拟南芥赤霉素合成缺失突变体ga1-3及其野生型Ler为实验材料。赤霉素合成缺失突变体ga1-3的茎秆很短,外源喷施GA3能恢复突变体茎的伸长生长。研究表明赤霉素亏缺会导致拟南芥生物量降低。通过对突变体和野生型细胞壁组分含量的测定以及组织染色发现赤霉素合成缺失突变体ga1-3茎中的纤维素、果胶、半纤维和木质素含量均显著低于野生型,外源GA3能提高突变体ga1-3...  (本文共135页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中师范大学
华中师范大学

苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒ac75功能研究

苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa california multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)属于杆状病毒科 a-杆状病毒属。ac75 是 AcMNPV的第75个开放阅读框(open reading frame,ORF),其同源基因存在于所有感染鳞翅目和膜翅目昆虫的杆状病毒病毒基因组中,功能未知。本文构建了ac75基因缺失突变体,通过对ac75缺失突变体的系列实验分析,对ac75在AcMNPV复制中的作用进行了初步探究。ac75位于AcMNPV基因组上一个包含10个同向排列的ORF的基因簇(ORF73-82)中,全长 402 bp(63126-63527 nt),与相邻的 ac74 和 ac76 互不重叠,编码133个氨基酸残基(amino acid,aa)。通过序列分析发现在ac75 ORF上游-15 nt,-94 nt,-139 nt和-142 nt四处存在典型的晚期启动子...  (本文共66页) 本文目录 | 阅读全文>>

江苏大学
江苏大学

激活标签法构建油菜突变体库及油菜蜡质缺失突变体的转录组分析

目前油菜(Brassica napus L.)的全基因组测序已经完成,油菜正式进入后基因组时代,基因功能的验证需要大量的突变体材料。通过构建油菜突变体库,可以加快油菜新突变体的发现。在本研究中,我们通过浸花法将pCB260-Kan质粒大规模转化甘蓝型油菜,然后通过Kan水溶液筛选和PCR鉴定,建立了甘蓝型油菜激活标签插入突变体库,从中挑选到了蜡质缺失突变体(wad),并进行了详细的表型分析和转录组分析。本研究的主要结果如下:1.突变体库的初建及通过Kan初步筛选转化株实验室先前利用除草剂对转化株进行筛选,但后期发现植株在移栽过程中很容易死亡。在本部分,我们将pCB260载体上的除草剂抗性基因替换成Kan抗性基因,并通过浸花法将pCB260-Kan质粒大规模转化甘蓝型油菜。然后我们建立了适用于甘蓝型油菜的筛选方法,相较于喷洒除草剂筛选,通过Kan溶液浸泡种子筛选,更加便于控制,对每株转化株的选择压力更加均匀。在通过Kan溶液初步筛...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南大学
湖南大学

拟南芥FOF2基因在非生物胁迫中的功能研究

F-box蛋白是组成SCF复合体的一个重要成分,通过特异性识别和结合底物,介导底物通过泛素化降解途径降解。该蛋白家族在植物生长发育过程中具有重要调控作用。我们实验室前期研究发现,F-box蛋白FOF2调控植物开花。采用生物信息学分析FOF2基因的启动子,发现启动子中含有多个非生物胁迫反应调控元件,因此推测FOF2可能参与调控植物非生物胁迫响应。本研究通过分析不同逆境胁迫对FOF2基因表达的影响,FOF2过量表达或缺失对植物抗逆境胁迫的影响,以及FOF2靶蛋白筛选和相互作用验证,系统研究了FOF2在植物抗逆境胁迫的响应中的功能及作用机制。1.首先利用生物信息学结合基因实时表达水平检测的方法进行分析。结果显示FOF2的启动子存在非生物胁迫相关的作用元件,并且FOF2蛋白有多个潜在泛素化位点。定量分析FOF2在野生型中的表达水平,发现其表达量受到了 ABA、干旱、NaCl和冷的诱导。2.过表达株系(MycOF20xl、MycFOF2o...  (本文共74页) 本文目录 | 阅读全文>>