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葡萄ACO1基因启动子克隆及功能分析

欧洲葡萄(Vitis vinifera)果实内的糖分含量高、口感香甜,是人们酿制葡萄酒的主要原材料之一,具有较高的经济价值。但其抗逆性较差,生长发育过程中易受到病虫害及环境变化等胁迫的侵害,导致其品质和产量受到严重的影响。研究表明,乙烯在植物抵抗逆境胁迫的过程中发挥着重要的作用,而在乙烯的生物合成途径中ACC氧化酶发挥了十分重要的作用,它能直接催化ACC(1-氨基环丙烷-1-羧酸)转变为乙烯,因此,研究ACC氧化酶基因表达调控的分子机制具有非常重要的意义。本实验选取欧洲葡萄中ACO1基因的启动子进行克隆和功能分析,从而为葡萄抗逆性研究提供理论依据。利用普通PCR技术,从欧洲葡萄基因组DNA中克隆获得VvACO1基因启动子序列,长度为1956bp,在顺式作用元件分析网站PlantCARE中分析启动子序列中包含的元件,发现该基因启动子序列中包含多种植物逆境胁迫响应元件,如抗氧化胁迫响应元件、热击胁迫响应元件等;还包含多种植物激素响应  (本文共49页) 本文目录 | 阅读全文>>

甘肃农业大学
甘肃农业大学

甜瓜ACO1启动子的组织特异调控研究

提高果实耐贮运性的研究一直是甜瓜育种的重要目标,更是生产上亟待解决的难题。近年来的研究表明利用基因工程技术可延迟果实成熟,获得了一系列转基因植株,但研究中大多数采用组成型启动子,在其控制之下,外源基因在转基因植物中的表达可维持一个恒定水平。这种外源基因在受体植物中的非特异性的持续高效表达不但造成无谓的能量浪费,而且还会在需要该基因大量表达的时间或特异组织部位则因表达量过低而达不到预期效果。因此,在植物转基因研究中,选择诱导性或组织特异性表达启动子则可大大提高外源基因表达的效果,减少能量和物质的消耗,增加表达的产物量。使转基因植物中外源基因的表达量以及时空特征都受到调控,以适应不同的需要。本研究针对甜瓜转ACC氧化酶反义基因中使用35S组成型启动子,在已克隆出的CM-ACO1果实特异性启动子的基础上,做了以下研究:1.植物表达载体的构建策略:用限制性内切酶HindⅢ与BamHⅠ分别对双元载体pBI101.2和质粒pCM-ACO1-...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国农业科学》2007年03期
中国农业科学

协同抑制番茄ACO1对果实成熟及病程相关蛋白基因表达的影响

目的探讨协同抑制番茄ACO1基因对果实成熟和病程相关蛋白基因表达、内源乙烯生物合成及果实耐贮性的影响。方法采用PCR或RT-PCR方法克隆了番茄ACC氧化酶1、ACC氧化酶3、EBF1、PR1、PR5以及NP24基因片段,并以此制备探针,以协同抑制ACO1的转基因番茄和野生型番茄为研究对象,进行Northern杂交,同时测定了伤害叶片和果实的乙...  (本文共8页) 阅读全文>>

河北科技师范学院
河北科技师范学院

观赏海棠叶花果表型变异及果实宿存相关的乙烯、脱落酸和ACO1基因研究

本文以70个观赏海棠品种作为试验材料,对其表型性状进行调查测量。对果实脱落与宿存差异的5个品种,测量果实不同时期的脱落酸和乙烯含量,并克隆乙烯生物合成相关基因ACO1(ACC氧化酶基因),比较了该基因不同时期不同品种荧光定量表达差异。主要的研究结果如下:1、70个观赏海棠品种叶花果表型的数量性状差异极显著,变异系数为9.78%~125.2%,变异系数最大的为单果重,变异系数最小的为果形指数。观赏海棠不同品种间花色、花型、开花物候期、叶色、果色等性状存在多样性。2、观赏海棠不同品种果实脱落时期不同,脱落最早的品种8月初果实全部脱落。果实宿存的5个品种(‘唐纳德·怀曼’海棠、‘红宝石’海棠、‘糖美林’海棠、‘亚当斯’海棠、‘大卫’海棠),挂果期可以持续到第2年3月份。观赏海棠不同品种的果实脱落位置存在不同,一是从果梗与枝的结合处脱落,二是从果梗与果实结合处脱落。3、‘绚丽’海棠、‘火焰’海棠果实脱落较早,‘唐纳德·怀曼’海棠、‘红宝...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国油料作物学报》2019年01期
中国油料作物学报

小桐子ACO1基因的克隆与表达分析

为探讨ACO1基因在小桐子抗逆中的作用,本研究基于小桐子最新注释的基因组数据库,首次克隆了小桐子ACO1基因的全长CDNA序列,命名为Jc ACO1,并对其功能结构域、系统进化、基因结构及器官和低温表达特性进行了分析。结果表明,克隆的Jc ACO1基因全长为1 022bp,编码319个氨基酸,预测分子量为36. 0...  (本文共8页) 阅读全文>>

《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012年10期
西北农林科技大学学报(自然科学版)

苹果ACO1转录因子MdHB-1基因的克隆及其真核表达载体的构建

【目的】通过生物信息学分析,将苹果的一段EST序列初步定性为转录因子MdHB-1基因,对该基因进行克隆和真核表达载体构建,为进一步研究其分子生物学功能奠定基础。【方法】根据番茄LeACO1转录因子LeHB-1的基因序列,对苹果EST库进行Blast,获得一段EST序列,根据该EST序列设计1对特异性引物,以"皇家嘎啦"苹果花器总RNA为材料,经RT-PCR得到1条长约1 000bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定及分析。将基因MdHB-...  (本文共7页) 阅读全文>>