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利用产核苷磷酸转移酶重组大肠杆菌生物催化合成5'-肌苷酸

非特异性酸性磷酸酶(nonspecific acid phosphatases,NSAPs)是一类能催化水解、转磷酸等反应,特异性高。细菌源的广底物谱的酸性磷酸酶(AP/PTase),在酶学研究和工业生产领域受到广泛关注。利用非特异性酸性磷酸酶合成5'-肌苷酸是其重要用途之一。5'-肌苷酸常被用作食品添加剂和药物合成中间体,其绿色、高效的酶法合成技术备受重视。本文以核苷磷酸转移酶重组菌Escherichiacoli BL21(DE3)/pET28b-AP/PT为研究对象,进行了产酶条件优化,并在此基础上确定了5L发酵罐分批发酵工艺,然后进行了固定化研究。研究了E.coli BL21(DE3)/pET28b-AP/PT的培养基成分及诱导条件对其生长和产核苷磷酸转移酶的影响。通过单因素实验,确定了Ecoli BL21(DE3)/pET28b-AP/PT产核苷磷酸转移酶的最优产酶培养基为(g/L):甘油7.5,蛋白胨12.5,酵母粉1  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

《发酵科技通讯》2013年03期
发酵科技通讯

重组核苷磷酸转移酶产生菌培养条件优化

5'-肌苷酸是一种重要的食品增鲜剂。核苷磷酸转移酶能够高选择性地使肌苷5'-位羟基磷酸酯化生成5'-肌苷酸,该反应不需要ATP,具有反应条件温和、反应速度快、位置特异性强、转化率高、环境友好等特点。以实验室前期构建的携带有来自Escherichia blattae磷酸转移酶(AP/PTase)编码基因的重组大肠...  (本文共4页) 阅读全文>>

《发酵科技通讯》2013年04期
发酵科技通讯

重组大肠杆菌生产核苷磷酸转移酶的发酵条件优化

核苷磷酸转移酶能够特异地将无机焦磷酸(PPi)的磷酸根转移到核苷5′-位的羟基上,该过程并不需要ATP的参与,且具有选择性高和反应条件温和等特点。以实验室前期构建的重组大肠杆菌E.coli B...  (本文共4页) 阅读全文>>

《食品与发酵工业》2020年15期
食品与发酵工业

改造非磷酸转移酶葡萄糖转运途径强化解淀粉芽胞杆菌合成L-酪氨酸

L-酪氨酸是一种重要的营养必需氨基酸,广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。非磷酸转移酶葡萄糖转运途径是细菌吸收转运葡萄糖的重要途径,对细菌的新陈代谢具有显著的影响。以解淀粉芽胞杆菌HZΔptsH为出发菌株,表达了不同物种来源的葡萄糖转运蛋白编码基因,探究非磷酸转移酶葡...  (本文共5页) 阅读全文>>

《广西科学》2000年01期
广西科学

油菜籽焦磷酸:果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶的动力学研究

采用 DEAE- Sephadex A- 5 0及磷酸纤维素柱层析 ,用底物亲和洗脱法从萌发油菜 (Brassica napus)种子中分离纯化了焦磷酸 :果糖 - 6 -磷酸 1-磷酸转移酶 (PFP)。纯化倍数 6 79.7倍 ,比活力为 2 1.75单位 /毫克·蛋白 ,活力回收率 2 2 .9%。酶的最适 p H值为 7.5 ,Mg2 +和 ...  (本文共5页) 阅读全文>>

《食品科学》2009年01期
食品科学

潮霉素磷酸转移酶的致敏性评价研究

潮霉素磷酸转移酶基因广泛用于转基因生物的基因转化过程中,该基因(hpt)编码的蛋白属于无食用和食物过敏史的处源目的蛋白。根据IFBC-ILSI制定的转基因食品致过敏性评价方法,进行了与已知的过敏蛋白的氨基酸序列相似性比较、消化稳定性实验以及动物模型实验。结果表明,未发现连续8个氨基酸序列相同...  (本文共4页) 阅读全文>>