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基于高通量技术的高效秸秆类纤维素降解菌筛选及应用

纤维素类生物质资源是自然界中最丰富的可再生资源之一,纤维素资源的开发利用对于解决当前环境污染、能源危机和粮食短缺等世界性难题具有重要的意义。为进一步增加纤维素生物质的分解效率,获得更多的纤维素降解菌资源,因此,开展了纤维素降解菌筛选的研究。本研究首先建立了高通量纤维素降解菌的筛选方法。基于传统的纤维素降解菌筛选原理,以24孔板和96孔板作为载体减小体系和增加筛选通量,结合刚果红培养基的鉴别作用,以及酶标仪批量采集数据的功能,建立了一套微量、灵敏、快速的高通量筛选方法,并对该方法的培养体系及检测体系进行了优化。结果发现,当24孔深孔板的装液量为2.5mL,培养时间为48h时,微生物的生长效果最好。当酶标仪的检测波长为500nm,96孔板中DNS添加量为120μL时,检测体系的准确性最佳。基于本研究建立的高通量筛选方法,从牛粪中初筛得到9株纤维素降解菌。24孔板发酵复筛后,选取纤维素酶高产菌C-7进一步研究。菌株C-7为革兰氏阳性短  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建农林大学
福建农林大学

蔗作土壤纤维素降解菌优势株系的筛选研究

我国农作物生产中过施、偏施化肥现象严重。甘蔗作为单位面积生物产量最高的大田作物,生育期长,需肥量大。我国主产蔗区广西、云南、广东、海南植蔗条件多为丘陵红壤,受灾害性气候影响频繁,甘蔗耕层浅薄、易流失;地力瘠薄,酸化普遍;土壤团粒结构匮乏,易板结。持续改善和提升蔗作土壤生产力,是减少肥料投入,降低生产成本,实现产业绿色发展的重大关键技术之一。在原料蔗茎收获进厂压榨的同时,约有占.甘蔗田间生物量20%左右的未成茎蔗株、蔗梢、蔗叶、叶鞘等弃置于田间,这些秸秆中含有大量的碳、氮、磷、钾及其他微量元素,纤维素含量很高,C/N约为60,具有巨大的养分转化利用潜力,但降解速度较慢。传统的甘蔗秸秆处理方法多为焚烧,不仅污染环境,也造成养分的浪费。近年来,作物秸秆还田及纤维素资源的高效利用受到国内外广泛重视,尤其是利用土壤微生物进行纤维素高效降解和转化的生物技术途径更成为业界研究的热点。为了研究和拓宽蔗作土壤的纤维素降解菌资源,筛选出优势菌株,摸...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

低温纤维素降解菌的筛选及其玉米秸秆降解效果研究

作物秸秆还田是目前农业废弃物处理的主要方式,不但可以降低秸秆就地焚烧所引起的大气污染问题,而且有利于提高秸秆利用率、改善土壤结构、对土壤增肥保水等。但是直接还田处理的秸秆降解速度较慢,尤其是北方秋冬季节相对较长,温度较低,微生物活动受到抑制,秸秆不易降解,为农业耕种及生产带来了许多不利影响。因此,筛选出高效低温纤维素降解菌,加速秸秆降解是非常必要的。本试验从土壤样品中通过低温驯化培养,淘汰没有纤维素降解能力的菌株,并对剩余存活菌株进行低温纤维素降解驯化,进一步分离纯化得到19株纤维素降解菌。通过刚果红染色、滤纸条崩解对菌株进行初筛,得到13株具有纤维素降解能力的菌株。在10°C培养条件下,对13株菌的羧甲基纤维素酶活力(CMCase)、β-葡萄糖苷酶活力(β-Gase)和滤纸酶活力(FPA)进行测定,最终获得3株高效低温纤维素降解菌,经分子生物学鉴定,菌株ZS-7为枝孢霉菌(Cladosporium sp.),菌株ZS-8为链格...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

《吉林农业》2019年13期
吉林农业

一株高效纤维素降解菌的筛选及其初步分类鉴定

本研究从醋糟中筛选出一株高效纤维素降解菌SH-1,通过形...  (本文共2页) 阅读全文>>

《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012年04期
西北农林科技大学学报(自然科学版)

纤维素降解菌的筛选与高效混合菌群的构建

【目的】从土壤中筛选纤维素降解菌,对其进行组合培养获得可高效降解纤维素的混合菌群,为微生物混合培养降解纤维素提供理论基础。【方法】采用刚果红纤维素琼脂平板培养基从土样中初步筛选纤维素降解菌,再以内切酶(CMC)、纤维素全酶(FPA)、外切酶(C1)和β-葡萄糖苷酶(β-Gase)4种酶活性为指标进行复筛,对复筛获得的...  (本文共6页) 阅读全文>>

宁夏大学
宁夏大学

纤维素降解菌的筛选及其降解性能研究

针对秸秆在堆肥过程中腐解缓慢、发酵时间长、碳氮损失率高等问题,本研究从宁夏秸秆堆、畜粪和土壤中分离、筛选高效纤维素降解菌,并以其为研究对象,重点开展纤维素降解细菌和真菌的不同菌株对玉米秸秆堆肥发酵效果的比较研究,明确各菌株在堆肥材料营养物质转化上的差异性。主要取得以下结果:采用基础培养基和刚果红-纤维素钠培养基对低温堆肥物料、稻秸腐烂物、新鲜牛羊粪便和土壤等样品进行纤维素降解菌的分离,根据水解圈与菌落直径比(D/d≥2.0)初筛获得15株纤维素降解菌;通过比较滤纸纤维素酶活力进行复筛,获得具有较高纤维素降解能力的真菌和细菌各2株,编号为 Z5-3、Z6-4、X11-1 和 X3-5-1。对筛选出的纤维素降解菌进行形态学、生理生化性质和分子鉴定,明确纤维素降解菌Z5-3为黄曲霉(Aspergillus flavus)、Z6-4 为非洲哈茨木霉(Trichoderma afroharzianum)、X11-1 为藤黄单胞菌(Lute...  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>