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造血调控因子的载体构建及感染效率优化

造血干细胞(Hematopoietic Stem Cells,HSCs)是一种能够自我更新和分化为所有血系细胞的成体干细胞,虽然在体内数目稀少,但在造血发生和免疫系统中有着重要的作用。目前,造血干细胞移植是治疗和治愈恶性血液病、重型再生障碍性贫血、一些实体瘤等疾病最有效的方法。然而,造血干细胞来源有限、数量不足和扩增困难等缺陷,是造血干细胞移植治疗血液疾病的难关。近年来,通过大量基因敲除小鼠模型和白血病人的血液分析鉴定出许多与造血系统密切相关的转录因子,这些转录因子在造血干细胞自我更新和成熟分化中发挥重要作用。人们思考能否通过这些转录因子将病人的其它细胞转分化为造血干细胞。已有文章表明转录因子可以将小鼠的内皮细胞转分化为造血干细胞。也有文章报道可以把人的诱导多潜能干细胞(induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)分化为生血内皮,再通过转录因子诱导分化为造血干细胞。对人而言,内皮细胞是一种难以获得的  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国医药指南》2013年22期
中国医药指南

提高腺病毒载体的感染效率的研究进展

人类腺病毒(adenovirus,Ad)常作为肿瘤治疗的溶瘤细胞介质或抑瘤基因递送载体,其中最为常用的就是腺病毒5型(Ad5)。...  (本文共2页) 阅读全文>>

《厦门大学学报(自然科学版)》2005年06期
厦门大学学报(自然科学版)

重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞株的感染效率及EGFP表达水平研究

研究重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞的感染效率及表达水平,可为痘苗病毒表达系统宿主细胞的正确选择提供依据.本研究利用重组绿色荧光蛋白基因的痘苗病毒WR-EGFP同时感染不同的哺乳动物细胞株,利用流式细胞仪检测EGFP的表达...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生命科学研究》2015年04期
生命科学研究

细胞培养液pH对慢病毒包装及感染效率的影响

为解决实验室中包装慢病毒转染效率低、感染效率低的问题,从培养液p H角度对病毒包装及感染进行优化。首先构建慢病毒载体cop GFP质粒,采用磷酸钙法和Lipofectamine2000法,转染不同p H培养液培养的293T细胞。在荧光显微镜下比...  (本文共5页) 阅读全文>>

《临床口腔医学杂志》2013年01期
临床口腔医学杂志

慢病毒载体感染人口腔黏膜成纤维细胞稳定表达绿色荧光蛋白的研究

目的:确立慢病毒载体高效感染人口腔黏膜成纤维细胞的感染条件,为进一步应用基因工程技术研究人口腔黏膜成纤维细胞奠定基础。方法:采用组织块法培养原代人口腔黏膜成纤维细胞,免疫组化SP法鉴定细胞类型,将携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体以不同感染复数(multipli...  (本文共3页) 阅读全文>>

《潍坊医学院学报》2013年01期
潍坊医学院学报

三质粒慢病毒包装细胞体系的构建及其感染效率检测

目的建立一种基于三质粒的慢病毒包装细胞体系并对其感染效率进行检测。方法利用双酶切方法构建一个pLVTHM重组慢病毒表达载体,然后与pSPAX2,pMD2.G共转染HEK293T获取慢病毒原液,利用高速离心的方法对其进行浓缩纯化。设定不同感染复数(1,5,10,15,20),将上述制备的慢病毒制品感染HEK293T和HepG2肝癌细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达水平以确认制备的病毒是否成功,其感染效率如何。结果利用一段非沉默性基因片段,...  (本文共4页) 阅读全文>>