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黑暗链霉菌S.tenebrarius H6中与抗生素有关生物合成基因的克隆

链霉菌S.tenebrarius H6产生氨基糖甙类抗生素[阿普霉素(Apramycin,Am)、妥普霉素(Tobramycin)及卡那霉素B(KanamycinB)]。为了研究其菌体内抗生素生物合成基因,首先建立该菌株的完整基因文库。提取S.tenebrarius H6总DNA,经不完全酶切、蔗糖梯度离心,收集得到20~30kb片段连接入柯斯载体pKC505。噬菌体蛋白体外包装、转导大肠杆菌E.coliDH1,随机挑取2880个的转化子以单克隆保存于-70℃ 30个96空板中。经检测,文库覆盖率达到99.9%。为寻找合适的探针基因筛选文库,首先尝试利用链霉素产生菌Streptomyces griseus中StrE、StrD、StrO基因与S.tenebrarius H6总DNA进行Southern杂交,未见阳性信号。根据链霉菌内多种同源基因的保守性,参考已发表的14种链霉菌中与己糖次级代谢有关的dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶  (本文共78页) 本文目录 | 阅读全文>>

云南大学
云南大学

杜邦嗜热菌两个转录因子及其调控的生物合成基因的研究

真菌蕴含丰富多样的天然产物生物合成基因和基因簇(Biosynthetic Gene Cluster,BGCs),但是这些基因和基因簇在实验室条件下表量低或是不表达,导致被报道的真菌天然产物数量远低于预测BGCs数量的。目前研究多采用过表达正调控因子的方法来激活真菌次生代谢产物的生物合成,而关于负调控因子对真菌次生代谢产物影响的研究却鲜有报道。此外,在异源宿主中表达真菌中的沉默基因也是发掘和研究真菌次生代谢产物的有效方式。杜邦嗜热菌(Thermomyces dupontii2155)是一类从高温环境中分离鉴定的丝状真菌,前期本实验室从中分离得到一类色素类吲哚生物碱类化合物Talathermophilins和具有新颖结构且对线虫具有显著毒杀活性的大环内酯化合物Thermolides,并鉴定了 Thermolides的生物合成基因。进一步的研究发现该真菌中的大多数生物合成基因仍处于沉默状态,特别是该菌中唯一的Ⅰ型PKS-NRPS杂合基...  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>

《微生物学报》2008年07期
微生物学报

海洋共附生微生物天然产物生物合成基因研究进展

对海洋无脊椎动物天然产物的研究表明,很多种活性物质的真正生产者是与其共生或附生的未培养微生物。克隆这些未培养微生物中特定活性物质的生物合成基...  (本文共5页) 阅读全文>>

《药物生物技术》2009年03期
药物生物技术

抗生素生物合成基因的克隆策略

微生物产出众多结构和生物活性多样的抗生素,其生物合成基因簇的克隆是深入研究其合成机制、提高产量和改造其结构的必要前提。文章对抗生素生...  (本文共5页) 阅读全文>>

《宜宾师范高等专科学校学报》1999年02期
宜宾师范高等专科学校学报

花瓣发育期间色素生物合成基因的调控

开花植物的有性生殖依赖于花的形态建成。通常,花由四轮器官组成:乌片、花瓣、雄蕊和雌荡。枣片和花瓣可被看...  (本文共3;页) 阅读全文>>

《生物技术通报》1988年03期
生物技术通报

京都大学克隆化小檗碱的生物合成基因

日本京都大学农学部教授山田康之等克隆化植物次生代谢产物小檗硷的生物合成基因成功。准备于4月在东京召开的日本农艺化学会上详细发表。如果把小檗硷的生物合成基因的研究作为典型事例...  (本文共1页) 阅读全文>>