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FMDV P1基因转化玉米和HIV-1 gag与gp120基因转化番茄的研究

本研究分别将编码口蹄疫病毒(Foot and Mouth disease Virse,FMDV)的结构蛋白P1全长基因,人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV-1)的结构蛋白gag基因、外膜糖蛋白gp120基因及gag-gp120嵌合基因克隆到含CaMV35S启动子控制下的植物表达载体中,构建了七种植物表达载体,pBI131SP1、pBI121P1、pBI121AP1、pBI121gag、pBI121gp120、pBI121gag-gp120和pBI131Sgp120,利用改进的冻融法将其导入农杆菌LBA4404和EHA105,构建了植物双元表达载体,为利用基因枪和农杆菌转化玉米、番茄提供了载体系统。以玉米自交系8902、340、4112未成熟幼胚为材料,诱导、继代筛选出良好的Ⅱ型胚性愈伤组织,以其Ⅱ型胚性愈伤组织为受体,通过农杆菌介导法和基因枪轰击法将FMDV的P1基因转化玉米,获得抗  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

马铃薯转FMDV P1全长基因的研究

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种烈性家畜传染病,为了制备安全、有效的新型基因工程疫苗,人们积极探索FMDV转基因植物的研究,研究结果表明用植物表达系统生产安全有效的口蹄疫口服疫苗是完全可行的。本实验室已构建了FMDV P1全长基因的高效植物表达载体并用于转化马铃薯。本研究在此基础上,寻找影响口蹄疫基因在马铃薯中高效表达的主要因子,对抗性筛选标记和抑制剂进行浓度筛选试验,对不同的马铃薯品种材料确定适宜的预培养时间、农杆菌载体、农杆菌菌液浓度及侵染时间,建立了比较完善的遗传转化体系。通过农杆菌介导法与基因枪法对2 个马铃薯品种和3 种马铃薯外植体进行遗传转化,对获得的抗性苗应用PCR、PCR-Southern、Southern杂交、斑点杂交等技术进行检测,得到了转目的基因马铃薯阳性植株,表明已将FMDV P1 全长基因导入马铃薯中。对阳性植株进行SDS-PAGE 实验,初步推断FMDV P1 全长基因在马铃薯中进...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

《Agricultural Science & Technology》2013年08期
Agricultural Science & Technology

FMDV P1基因DNA疫苗构建及免疫实验(英文)

[目的]构建口蹄疫DNA疫苗。[方法]构建以PRV为载体的表达FMDV P1基因的质粒pIESZP1和pUTK3CP1,免疫小鼠并检测了免疫后小鼠的抗体水平。将构建的2个真核表达质粒分别转染Vero细胞,通过PCR、IFA、Western-blot等方法检测...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国兽医学报》2011年02期
中国兽医学报

FMDV P1基因在重组PRV的表达及实验免疫研究

为获得FMDV的衣壳蛋白前体P1和P1与3C基因的重组伪狂犬病毒,并评价两重组病毒的免疫效果,进行了本项研究。将构建的重组转移质粒pIESZP1和pUTK3CP1,用脂质体转染预先感染0.1 MOI PRV的Vero细胞,经120 h培养收获病毒后,再分...  (本文共5页) 阅读全文>>