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人乳头瘤病毒16型E7病毒癌基因干扰细胞周期调控与宫颈癌关系的研究

目的 为了解人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)16型的E7基因对细胞周期的影响及该影响对细胞转化的作用,探讨HPV-16E7基因在宫颈癌进展中的作用。方法 收集宫颈癌标本,并经病理鉴定。从中筛选HPV16阳性标本,从标本中经PCR扩增回收HPV16E7基因片段,将鉴定正确的E7基因片段插入到穿梭质粒pAdTrack-CMV后,与骨架质粒pAdEasy-1在Bj5183中同源重组,重组质粒转染HEK-293细胞,包装表达HPV16E7基因的重组腺病毒,感染HPV-18阳性的Hela细胞,MTT法测细胞的增值率,流式细胞仪测感染前后细胞周期相的改变和细胞周期蛋白D表达的差异。结果 在荧光显微镜下可以看到转染成功的HEK-293细胞中有绿色荧光蛋白的表达,从中可以收获高感染效率的重组腺病毒,重组腺病毒感染的Hela细胞中也有绿色荧光蛋白的表达,提取HEK-293细胞RNA,反转录PCR可以检测到E7基因的  (本文共69页) 本文目录 | 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

人乳头瘤病毒16型E7病毒癌基因干扰细胞周期调控与宫颈癌关系的研究

目的研究重组腺病毒介导HPV16E7基因转染对人宫颈癌Hela细胞周期蛋白cdc25A和CyclinE的影响。方法从宫颈癌标本中经PCR扩增回收HPV16E7基因片段,并将其插入含有绿色荧光蛋白报告基因(GFP)的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,在E.coliB J5183感受态细菌内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,构建重组腺病毒基因组Ad-E7。用脂质体介导线性化的Ad-E7转染入包装细胞HEK-293细胞,包装表达E7基因的完整腺病毒颗粒。收集腺病毒上清并在HEK-293细胞扩增腺病毒上清滴度。取第4代病毒上清感染体外培养的人宫颈癌Hela细胞。采用RT-PCR检测转染前后Hela细胞cdc25A mRNA表达的差异;采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)方法检测转染前后细胞周期蛋白E(CyclinE)表达的差异。结果荧光显微镜下转染后HEK-293细胞和HeLa细胞绿色荧光蛋白表达。在HEK-293细胞中...  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

《广东农业科学》2012年19期
广东农业科学

不同肥料对生防菌淡紫拟青霉E7定殖的影响

为了解不同肥料对淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的影响,以淡紫拟青霉E7为材料,研究了不同肥料对E7在香蕉根际土壤定殖的影响。结果表明,最适宜淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的尿素(F1)浓度为1.6 g/kg,其后依次为3.2、6.4、0.8、0.4g...  (本文共3页) 阅读全文>>

《上海免疫学杂志》1999年06期
上海免疫学杂志

人乳头瘤病毒16型E7核酸疫苗的构建及鉴定

人乳头瘤病毒16 型在引起宫颈上皮转化过程中, 持续表达E7 蛋白, 有可能成为肿瘤特异性移植抗原。本文将E7蛋白的编码基因定向克隆于真核表达载体构建了HPV16E7HB核酸疫苗, 将该疫苗直接注射BALB/c 小...  (本文共3;页) 阅读全文>>

《原子与分子物理学报》2013年06期
原子与分子物理学报

分数Poynting-Thomson模型对E7复介电常数的应用

基于分数阶微积分理论和介电分数单元,建立了分数Poynting-Thomson模型,给出了复介电常数的表达式.利用遗传算法结合共轭梯度法,分别求得复介电常数实...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国农学通报》2012年30期
中国农学通报

几种肥料对淡紫拟青霉E7菌株产孢量的影响

为了解不同肥料对淡紫拟青霉E7菌株产孢量的影响,采用化肥尿素(F1)和芭田世界通复合肥(F2)、有机肥有机钾宝(F3)和奥普尔腐植酸有机矿化活性冲施肥...  (本文共4页) 阅读全文>>

《广西农业科学》2009年05期
广西农业科学

淡紫拟青霉E7菌株抗逆性研究

对淡紫拟青霉E7菌株的耐热性、耐酸碱性、耐盐性及耐化学药物特性进行测定。结果显示,在PSA培养基上,E7菌落生长和产孢的适宜温度为5~40℃,最适温度为29℃;E7菌株在pH 4~13范围内的培养基上均可以生长;在40℃和50℃条件下E7菌株的LT50分别...  (本文共4页) 阅读全文>>