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RNA干扰介导抑制家蚕核型多角体病毒(BmNPV)增殖的研究

为了探讨利用RNAi抑制病毒复制、增殖的效果,选取家蚕核型多角体病毒(BmNPV)对复制具有关键作用的极早期表达基因ie-1、解旋酶基因helicase以及对细胞释放型病毒(CRV)水平传播具有关键作用的病毒囊膜蛋白基因gp64为靶基因,体外合成了与其相对应的dsRNA,经脂质体转染家蚕BmN细胞,感染病毒粒子或共转染病毒基因组DNA,研究比较了供试dsRNA对BmNPV复制、增殖的抑制效果,探讨dsRNA分子大小以及同时抑制2个基因表达对病毒滴度的影响,筛选最佳标靶基因序列,为结合利用转基因技术和RNAi技术进行家蚕抗病毒研究提供依据。本文的主要研究内容如下:一、ie-1基因相应dsRNA对家蚕核型多角体病毒复制增殖的抑制研究根据BmNPV的ie-1基因序列,人工设计并体外合成了长度为438 bp的dsRNA,利用脂质体转染家蚕细胞,研究其对BmNPV复制增殖的抑制效果。结果表明该dsRNA能有效地抑制病毒DNA的复制,最大抑  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国蚕业》2019年04期
中国蚕业

家蚕抗BmNPV品种选育研究进展

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhydrosis virus,BmNPV)病是养蚕生产中最常见、危害比较严重的病害;遗传学研...  (本文共6页) 阅读全文>>

《南方农业学报》2019年10期
南方农业学报

BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响

【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】以五龄家蚕为研究对象,经口喂食BmNPV,分别于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织,采用实时荧光定量PCR检测两种抗氧化酶基因(Bmsod和Bmcat)的表达水平,同时以抗氧化酶活性测试盒测定SOD和CAT的活性变化情况。【结果】BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病,主要表现为蚕体环节肿胀,狂躁爬行,体壁易破,体液...  (本文共6页) 阅读全文>>

《安徽农业科学》2017年20期
安徽农业科学

抗性家蚕血液中与BmNPV抗性相关铜化合物的分离方法研究

[目的]探究家蚕血淋巴中与BmNPV抗性相关铜化合物的分离方法。[方法]选取对BmNPV具有抗性的家蚕品种和非抗性品种为研究对象,对它们进行添食BmNPV病毒处理。提取家蚕的血淋巴,运用SEC-ICP-MS对2组样品中Cu化合物进行分离和检测。[结果]筛选出优化的体积排阻色谱...  (本文共6页) 阅读全文>>

《病毒学报》2017年05期
病毒学报

基于细胞转基因平台创制抗BmNPV的细胞素材

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是影响蚕业生产最为严重的病原之一,每年对我国蚕业生产方面造成很大的经济损失。通过RNA干扰技术(RNAi)干扰BmNPV的增殖关键基因可以有效地抑制病毒的增殖复制。本研究以BmNPV侵染关键基因gp64和lef-1为靶标基因,并利用病毒诱导型启动子LEF...  (本文共10页) 阅读全文>>

《西南农业学报》2010年06期
西南农业学报

云南不同地区BmNPV对家蚕致病力的研究

为研究家蚕病毒弱毒株系对强毒株系的交互保护作用,探索利用弱毒苗添食防治家蚕病毒病,试验收集了8种云南不同地区的BmNPV多角体,经纯化后,配制成102~108个/ML7种浓度多角体悬浮液,分别添食3龄起蚕,每种病毒的每种浓度为1个处理,每个处理3个重复小区,每小区30头蚕,调查记录各区蚕死亡头数,连续调查至供试蚕上蔟,累计死亡头数,计算各区蚕死亡率。参照吉田的方法计算其LC。结果表明,...  (本文共4页) 阅读全文>>