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产氨基酰化酶菌株的选育及发酵条件的优化

本研究所使用的米曲霉L-09(Aspergillus oryzae L-09)是通过紫外线诱变,经纸层析法初筛和亚硝基胍诱变,选育得到的一株氨基酰化酶产生菌株。紫外诱变后获得的菌株比出发菌产酶能力提高了60%,然后用亚硝基胍点试平板法诱变,酶活进一步提高了30.5%。在30℃条件下,培养2d,酶活可达到539.7U/g干曲。在研究营养条件和培养条件对L-09菌株产酶影响中发现:碳氮源、促进剂、培养基的料水比对L-09菌株产酶都有影响;发酵温度、发酵时间、接种量、pH对L-09菌株产酶也有影响。最佳营养条件和培养条件为:麸皮、豆饼粉比为8.0: 2.0,麦芽糖5g/L,吐温-80 5g/L,植酸0.5g/L,料水比为1: 1,pH7.0,在30℃下,发酵48h,酶活可达1254.4 U/g干曲。研究鲜曲的浸提条件,实验结果表明:以1: 10的固液比向鲜曲中加入pH 7.0、0.1mol/L磷酸缓冲液,于40℃,在100r/min振  (本文共56页) 本文目录 | 阅读全文>>

河南大学
河南大学

产氨基酰化酶米曲霉的诱变育种及其发酵条件优化

氨基酰化酶是一种能专一性水解DL-氨基酸的胞外酶,可将DL-氨基酸拆分获得D-氨基酸和L-氨基酸,因而在食品、医学等领域有着重要应用。本论文采用实验室保藏的米曲霉A0菌株作为出发菌株,将其制备成原生质体后进行紫外-氯化锂诱变,最终筛选出一株氨基酰化酶产量高且遗传稳定性好的诱变株A15。确定了该菌株制备原生质体的最佳条件:菌龄为30h,复合酶配比为1.5%蜗牛酶,1%溶菌酶,1.5%纤维素酶,酶解反应温度为28℃,酶解反应时间为3h,0.8mol/L NaCl渗透压稳定剂。在此条件下,米曲霉A0菌株的原生质体形成率和再生率都较为理想。确定了紫外-氯化锂诱变的最佳条件:诱变时间为80s,诱变强度为15cm,氯化锂浓度为0.9%。在功率为15W的紫外灯的照射下,按以上条件进行诱变处理。经过初筛选出15株变色圈直径与菌落直径比值大于出发菌株的诱变株,再经过复筛测定酶活力,筛选出5株酶活力明显比出发菌体提高的菌株,其中突变株A15的酶活力...  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

《基因组学与应用生物学》2014年03期
基因组学与应用生物学

D-氨基酰化酶的研究进展

D-氨基酰化酶是一类能特异性水解D-氨基酸N-酰基衍生物生成D-氨基酸的重要水解酶。随着D-氨基酸在医药、食品以及饲料等...  (本文共5页) 阅读全文>>

《发酵科技通讯》2010年01期
发酵科技通讯

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

通过在不同的反应时间,反应温度,缓冲液种类及pH条件下测定氨基酰化酶的活力,得出氨...  (本文共4页) 阅读全文>>

《氨基酸和生物资源》2009年01期
氨基酸和生物资源

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

通过在不同的反应时间,反应温度,缓冲液种类及pH条件下测定氨基酰化酶的活力,得出氨基...  (本文共4页) 阅读全文>>

《山西化工》2009年05期
山西化工

头孢菌素酰化酶的研究进展

头孢菌素酰化酶是一类可以催化头孢菌素C(CPC)和戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7ACA)生成7-氨基头孢烷酸(...  (本文共6页) 阅读全文>>

《微生物学报》2003年01期
微生物学报

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

为了从大量的候选菌株中快速筛选头孢菌素酰化酶产生菌 ,设计并合成了一系列头孢菌素酰化酶的底物类似物。这些酰胺类的底物类似物由二部分组成 ,一部分为与头孢菌素相同或相似的侧链 ,另外一部分为发色基团或便于检测的基团。它们被酰化酶水解酰胺键以后可以方便快速的检测 ,因此用于对大量...  (本文共8页) 阅读全文>>