全部 学问词条 学问文献 脱靶效应 相关学问

目的:脱靶效应的评估对核酸酶应用于人类基因治疗中至关重要。本课题运用蓝白筛选技术,建立CRISPR/Cas9剪切效率的原核评估系统,并利用该系统评估PAM位点处碱基突变时对其效率的影响,以及探讨不同个数及位置的碱基突变对CRISPR/Cas9靶效应及脱靶效应的影响。同时,通过白变...[详细]

苏州大学 硕士论文 2017年 下载次数(128) | 被引次数(0)

基因干扰(RNA interference,RNAi)是现代分子生物学领域的重大发现,该机制在不同进化地位的物种中高度保守。在昆虫学领域中,RNAi技术不仅为昆虫的功能基因组研究提供了便捷的方法,也为农业害虫的防治提供了新途径。然而,脱靶效应(off target effect)...[详细]

南京农业大学 博士论文 2015年 下载次数(802) | 被引次数(17)

CRISPR系统的发现给生物技术和分子生物学领域带来了重大变革,包括在多种活细胞和生物体内的基因组编辑和基因表达的调控。虽然这项技术为生物学、医学、农业带来了潜在的好处,但随之而来的由于基因组编辑后产生的不可逆的副产物,包括基因组范围内广泛的突变以及激活P53导致细胞死亡等问题依...[详细]

吉林大学 硕士论文 2020年 下载次数(131) | 被引次数(0)

目的:建立基于蓝白筛选技术进行评估CRISPR/Cas9酶活性的方法;使用此方法评估CRISPR/Cas9基因编辑的靶效应和脱靶效应。方法:人工构建基于蓝白斑筛选的含有CRISPR/Cas9靶序列的报告质粒,通过菌落产生的蓝变白与白变蓝两种不同变化,建立在原核水平检测CRISPR...[详细]

苏州大学 硕士论文 2016年 下载次数(471) | 被引次数(0)

CRISPR/Cas9作为新一代的基因定点编辑技术,具有成本低廉,操作简单等优点,现已被广泛应用于基因编辑领域。目前CRISPR/Cas9系统所面临的两个重大问题是如何最小化CRISPR/Cas9的脱靶效应,以及最大化CRISPR/Cas9的sg RNA对目标DNA的靶向切割效率...[详细]

桂林电子科技大学 硕士论文 2020年 下载次数(80) | 被引次数(0)

RNA干扰过程中,siRNA和mRNA特异结合能够使得靶基因沉默。但研究证实,siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,这种现象称为siRNA脱靶效应。多种真核生物中的RNA干扰...[详细]

《生物技术通报》2007年04期 下载次数(1225) | 被引次数(10)

目的:CRISPR-Cas9编辑系统的开发已经开创了基因编辑的新纪元,在生物学,医学,农业和其他领域都有广泛的应用。但Cas9核酸酶在细胞内的过表达会引起脱靶效应,并可能在体内触发免疫反应。为了控制Cas9蛋白在胞内持续表达,实现“适量就好”的Cas9蛋白表达模式,我们构建了一种...[详细]

广东药科大学 硕士论文 2020年 下载次数(164) | 被引次数(0)

细菌获得性免疫系统中II型CRISPR(clustered,regularly interspaced,short palindromic repeat;CRISPR)系统的CRISPR/Cas9核酸酶做为第三代基因编辑技术近年来被广泛应用。CRISPR/Cas9技术主要依靠单向...[详细]

西北农林科技大学 硕士论文 2020年 下载次数(97) | 被引次数(0)

CRISPR/Cas9基因编辑系统是第三代基因编辑技术,在生物医学领域有着广泛的应用。该系统由sgRNA和Cas9蛋白组成,sgRNA与Cas9结合并引导Cas9到达DNA靶点,Cas9作为核酸内切酶对靶序列进行切割,形成DNA双链断裂(double strand break, ...[详细]

《基因组学与应用生物学》2020年06期 下载次数(847) | 被引次数(4)

成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR蛋白9(Cas9)系统作为细菌对抗外源入侵DNA的防御机制已经被成功开发应用于真核生物基因组编辑,该系统具有高效准确且...[详细]

《重庆医学》2018年18期 下载次数(614) | 被引次数(2)